动物微生物病毒感染的实验诊断.ppt

2.中和试验病毒与特异性抗体进行免疫反应，使病毒失去感染性，在细胞培养和活的机体内不出现病变的试验。常用细胞培养进行中和试验。如果特异性抗体能中和病毒，使之失去感染性，不出现细胞病变效应，则该病毒为特异性抗体的同型病毒，第30页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三用于病毒的分型诊断最具敏感和准确性。也可用于检查患者病后或人工免疫后，机体血清中抗体增加情况。第31页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三3.空斑或蚀斑形成试验空斑是指在单层细胞中被病毒感染引起死亡的细胞区域，周围被活细胞包围。一般而言，一个空斑是由一个感染性病毒颗粒感染所引起的。不同的病毒引起的空斑形态和大小不同。可进行病毒颗粒的计数、纯化，结合中和试验可进行病毒的鉴定。第32页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三4.干扰现象某些病毒间存在着干扰现象，如某些型别的鼻病毒能干扰以后进入的副流感病毒的增殖，从而阻抑后者的红细胞吸附作用。第33页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三5.红细胞吸附及吸附抑制试验正粘病毒，副粘病毒感染的宿主细胞，病毒增殖后产生细胞病变，但在细胞表面含有病毒某些抗原成分(血凝素)，能吸附鸡、豚鼠或猴红细胞。第34页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三可作为初步鉴定。如果在培养瓶中加入相应的血凝素抗血清后，不出现红细胞吸附现象，是为红细胞吸附抑制试验阳性，可作为病毒鉴定的依据。第35页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三4．血凝试验及血凝抑制试验某些病毒可与一定种类的哺乳动物或禽类的红细胞产生血凝现象。加入相应的血凝素抗体可抑制血凝现象的发生，是为血凝抑制试验。可作为病毒型别确定的依据。第36页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三5．病毒的大小及形态可用电子显微镜观察病毒的大小及形态。第37页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三6．核酸类型鉴别及序列测定利用5—溴-2-脱氧尿苷(BUDR)抑制DNA复制的特性，在细胞培养液中加入该物质，可抑制DNA病毒的复制和增殖，抑制细胞病变的出现，但对RNA病毒无抑制作用，以此判断病毒核酸类型。第38页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三对病毒核酸特异序列或全序列的碱基排列测定或DNA杂交、DNA-RNA杂交来鉴定病毒。第39页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三7．耐酸试验肠道病毒对酸有耐受力，而鼻病毒在酸性环境下易被灭活。第40页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三8．乙醚敏感试验病毒外围如有类脂包膜，则易被乙醚破坏，而失去感染性，不能感染细胞。可作为病毒是否具有类脂包膜的依据，也可用氯仿或去胆酸钠代替乙醚进行试验。第41页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三9．免疫荧光抗体染色将感染细胞固定，用特异抗血清荧光标记染色，在荧光显微镜下，可见细胞内荧光，即可确定型别。第42页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三第三节病毒感染快速诊断

通过测定病毒的特异标志成分，如特殊形态、特异的抗原成分及病毒的核酸，早期确认病毒的感染，是病毒学诊断的重大发展。第43页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三一、形态学检查

1．光学显微镜观察病毒感染细胞出现的包涵体。根据特点可作出辅助诊断。狂犬病病毒在脑细胞出现嗜酸性的圆形或椭圆形包涵体，称为内基小体。巨细胞病毒在上皮细胞的细胞核内出现周围绕有一轮晕似“猫头鹰眼”样大型嗜酸性包涵体。第44页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三2．电子显微镜检查(1)电镜直接检查：早期病毒感染标本的病毒颗粒。如“秋季泻”患儿粪便中的轮状病毒、甲肝患者粪便中的HAV，疱疹病毒的疱疹液，HBV患者血清，均可观察到特征性病毒颗粒。第45页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三关于动物微生物病毒感染的实验诊断第1页，讲稿共63页，2023年5月2日，星期三然后根据可疑病毒的生物学特点、机体免疫应答和临