人乳头瘤病毒.ppt

关于人乳头瘤病毒第1页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三人乳头瘤病毒（HPV）HPV(人类乳头瘤病毒)是以人类为唯一宿主的一种DNA病毒，现在已经明确，HPV与宫颈癌的发生高度相关。医学数据表明，60％～70％的女性感染过HPV病毒，99.8％的宫颈癌患者中可以检测到HPV，而HPV阴性者几乎不会发生宫颈癌。除此之外，98％以上的宫颈疾病患者体内也存在HPV。第2页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三目前有100余种型别HPV,约35种型别与生殖道感染有关，大约20种型别与癌症相关。与宫颈癌相关的高危型HPV有13种：16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68。与宫颈癌相关的低危型别有：6，11，40，42，43，44。第3页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三HPV基因分型检测的意义?宫颈病变及宫颈癌的筛查，通过分型检测对患者个体化评估，预测宫颈病变发生的风险度,决定筛查的间隔、治疗方案的制定。?未明确诊断意义的非典型鳞状细胞和腺细胞（AS-CUS/AGUS）和宫颈上皮内低度病变（LSIL）的分流，提高诊断的可信度，降低漏疹风险。?宫颈病变治疗后的追综和随访第4页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三HPV阳性还可提示生殖器赘生物为尖锐湿疣的可能性。HPV感染与宫颈炎的发生有密切关系。HPV病毒也可引起宫颈糜烂。第5页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三宫颈癌筛查方案1.基本筛查方案醋酸或碘染色后肉眼观察阳性阴性阴道镜活检+病理检查相应治疗定期随访第6页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三2.一般筛查方案HPV检测+传统巴氏涂片HPV（-）Cyto≤ASC-USHPV（+）Cyto≤ASC-USHPV（-）Cyto≥ASC-HHPV（+）Cyto≥ASC-H随访（次/3-5年随访（次/年阴道镜检查/多点活检+ECC相应治疗（-）（+）第7页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三3.最佳筛查方案HPV检测+液基细胞学检查HPV（-）Cyto≤ASC-USHPV（+）Cyto≤ASC-USHPV（-）Cyto≥ASC-HHPV（+）Cyto≥ASC-H随访（次/3-5年随访（次/年阴道镜检查/多点活检+ECC相应治疗（+）（-）第8页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三HPV基因分型检测的方法我科目前采用分子生物学前沿技术—多重PCR（聚合酶链式反应）先进技术，通过对HPV-DNA基因分型，可快速、准确地检测常见的23种HPV亚型，包括5种低危型（HPV6，11，42，43，44）和18种高危型（HPV16，18，31，33，52等），覆盖了现有已知的与人生殖道感染有关的绝大部分HPV亚型。第9页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三HPV基因分型芯片技术特点HPV基因芯片分型检测，利用L区相对保守区的引物对待测样品中可能HPV亚型进行广谱扩增，再将产物与固定在膜芯片上的亚型特异性探针进行杂交，显色并判读结果。此技术灵敏、准确、高效、快速，并确定具体亚型。第10页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三GC-HPV检测实验流程第11页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三HPV检测目标物：宫颈脱落细胞、疣体组织、组织切片、活体组织第12页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三阴道镜下“活检”组织的采集通过阴道镜观察宫颈表面血管的病变，并用宫颈活检钳或宫颈管刮勺从宫颈上提取可疑组织，装入有保存液的洗脱管中，旋紧管盖，做好标识第13页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三疣体样本的采集用棉拭子在疣体表面剐蹭4-6遍，也可以把通过手术切除下来的疣体直接作为检测样本。第14页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三专用的宫颈脱落细胞采集器第15页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三步骤1.标本采集扩阴器暴露宫颈口，用棉拭子将分泌物擦去将宫颈刷伸入宫颈口，单向轻柔转动4-5周将其放入有保存液的洗脱管中旋紧管盖，做好标识将宫颈刷折断，刷头留在管中第16页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三步骤二：提取HPVDNA13000rpm10分钟，弃上清将标本转移到1.5mL微量离心管中加50?L裂解液充分悬浮沉淀100℃加热10分钟13000rpm离心10分钟，保留上清待用第17页，讲稿共28页，2023年5月2日，星期三步骤三：PCR扩增50℃ 15min95℃ 10min 94℃ 30s42℃