DB63T 1159-2012甘蓝型杂交油菜品种纯度检验 ISSR操作规程.pdf

ICS65.020.20

B33

备案号：35826-2013DB63

青海省地方标准

DB63/T1159—2012

甘蓝型杂交油菜品种纯度检验ISSR操作规程

2012-12-04发布2013-01-01实施

青海省质量技术监督局发布

DB63/T1159—2012

前言

本规程按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本规程由中国科学院西北高原生物研究所提出并归口。

本规程起草单位:中国科学院西北高原生物研究所、青海省种子管理站。

本规程主要起草人：李毅、胡延萍、宋晓荭、彭秉玉、王莉、王焕强、巩爱岐、包天忠、王溪、冯

承彬。

I

DB63/T1159—2012

甘蓝型杂交油菜品种纯度检验ISSR操作规程

1范围

本规程规定了甘蓝型杂交油菜（BrassicanapusL.和BrassicacampestrisL.）品种纯度ISSR

指纹鉴定的术语和定义、设备与耗材、试剂及溶液的配制、操作程序、判定原则及报告等技术内容。

本规程适用于各级科研、推广、生产单位和种子部门等在甘蓝型杂交油菜品种纯度检验时使用。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T3543.1农作物种子检验规程总则

GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样

GB/T3543.4农作物种子检验规程发芽试验

GB/T3543.5农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求

3术语和定义

下列术语和定义适用于本规程。

3.1

聚合酶链式反应（以下简称PCR）

一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法。

3.2

引物

一条互补结合在模板DNA链上的短的单链，在3′-OH端作为DNA合成的起点，延伸合成模板DNA的互补

链。

3.3

简单重复序列区间（以下简称ISSR）

根据某个简单重复序列（微卫星位点）作为特异引物，通过PCR反应扩增模板DNA链上微卫星位点

间隔的碱基序列。

4设备与耗材

1

DB63/T1159—2012

4.1设备

——高速低温离心机；

——PCR扩增仪；

——多用电泳仪及水平式电泳槽；

——紫外凝胶成像系统；

——微量移液器：规格为0.2L-2L，1L-10L，2L-20L，5L-50L，20L-200L，200L-1000L；

——电子分析天平；

——磁力加热搅