血型鉴定方法.ppt

第1页，讲稿共13页，2023年5月2日，星期三ABO血型鉴定实验原理抗原抗体反应——在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象→从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原→判断血型抗体在相邻的红细胞表面抗原决定簇之间搭桥形成肉眼可见的颗粒状凝集团块.见图第2页，讲稿共13页，2023年5月2日，星期三IgM抗体凝集红细胞示意图第3页，讲稿共13页，2023年5月2日，星期三IgM抗体凝集红细胞示意图IgGM在盐水介质中产生凝集第4页，讲稿共13页，2023年5月2日，星期三试剂抗A、抗B试剂血清5%的A型、B型及O型试剂红细胞悬液受检者血清5%的受检者红细胞悬液(从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。采血时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。)(取少量受检者红细胞（约0.2~0.5ml）用生理盐水洗涤3次，然后加入适量生理盐水调配成5%浓度。)第5页，讲稿共13页，2023年5月2日，星期三四实验步骤.swf1.玻片法（1）取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用记号笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。（2）用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。（3）竹签两头分别混合，搅匀。用两根分别用来混合A型和B型标准血清和红细胞悬液（4）观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。（5）判断血型根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。第6页，讲稿共13页，2023年5月2日，星期三2.试管法(正定型)ABA标准血清2滴B标准血清2滴受试者的红细胞悬液1滴1滴混匀后1000rpm离心1min或3000rpm离心15秒。。取出观察结果。完全凝集的管底部有红细胞的凝块，管底细胞边缘呈花边状，轻弹试管凝块不散；完全不凝的试管，血细胞均匀的沉到管底，边缘整齐，用手轻弹试管，红细胞像一缕烟似的立即上升，随即成为均匀的悬液;轻微凝集的，必须将液体转到载玻片上镜检后判定凝集程度。第7页，讲稿共13页，2023年5月2日，星期三

试管法(反定型)

AcBcOc受检者血清2滴2滴2滴5%的A型红细胞悬液1滴5%的B型红细胞悬液1滴5%的O型红细胞悬液1滴立即以1000rpm离心1分钟或3000rpm离心15秒。轻轻扣动试管底部，观察结果----同前第8页，讲稿共13页，2023年5月2日，星期三血型判定swf正定型反定型结果抗A抗BA型RBCB型RBCO型RBC--++-O+--+-A-++--B++---AB第9页，讲稿共13页，2023年5月2日，星期三五注意事项玻片、试管都要标记！！！，A及B标准血清绝对不能相混,不要依靠用染料颜色标记血清。工作中要形成自己的习惯！所用玻片、试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。红细胞悬液滴管头不能