致病菌的检验分支杆菌属及相似属.ppt

关于致病菌的检验分支杆菌属及相似属第1页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三第2页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三第1节分枝杆菌属(Mycobacterium)分支杆菌是一类细长或稍弯的杆菌，因有分枝生长趋势而得名。此菌属的最显著特性为其胞壁中含有大量类脂，可达菌体干重的40%，形成粗糙菌落，难用一般染料染色。第3页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三第1节分枝杆菌属(Mycobacterium)——若设法使之着色后，又不易以含3%HCI的酒精脱色。这种能抵抗盐酸酒精脱色的细菌称为抗酸杆菌。——本菌属种类颇多，其中可引起人类和动物疾病的有:（1）人型、牛型以及禽结核杆菌;（2）麻风杆菌。这些细菌多为慢性感染，因长期迁延而致组织病变。第4页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三第1节分枝杆菌属(Mycobacterium)分支杆菌属主要有3种：结核分支杆菌(M.tuberculosis)、牛分支杆菌(M.bovis)、禽分支杆菌(M.avium)，是引起人类以及畜禽结核病的病原体。这里只介绍结核分支杆菌。第5页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三一结核分支杆菌（M.tuberculosis）1、形态与染色特性——细长略弯,端钝园,0.4×1-4μm，单个或分枝状排列，无荚膜、无鞭毛、无芽胞。在陈旧的病灶和培养物中形态不典型，呈颗粒，串球，短棒，长丝形等。第6页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三一结核分支杆菌（M.tuberculosis）——结核杆菌常用萎-钠氏(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法染色，菌染成红色，其他非抗酸细菌及细胞等呈蓝色。第7页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三2、培养特性——专性需氧。营养要求高，在含蛋黄、马铃薯、甘油和天门冬素等的固体培养基上才能生长。最适pH6.5-6.8，最适温度37℃，生长缓慢，接种后培养3-4周才出现肉眼可见菌落。第8页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三2、培养特性——菌落干燥、坚硬、表面颗粒状、乳酪色或黄色，形似菜花。液体培养呈粗糙皱纹状菌膜，加入水溶性脂肪酸Tween-80，可降低结核杆菌表面的疏水性，使其呈均匀分散生长，有利于药物敏感试验。第9页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三3、抵抗力结核杆菌对某些理化因子抵抗力较强。在干痰中存活6-8个月；粘附于尘埃上，保持传染性8-10d；在3%HCl或NaOH溶液中耐受30min，常以酸或碱处理污染的样品，以杀死杂菌，提高检出率；对湿热、紫外线、酒精抵抗力弱:液体加热62-63℃15min，日光直射2-3h，75%酒精数分钟即死亡。第10页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三4、变异性对链霉素、利福平、异烟肼等抗结核药物易产生耐药性。耐药菌株常伴随活力和毒力减弱，如异烟肼耐药菌株对豚鼠的毒力消失，但对人仍有一定致病性。卡介菌(BacilliCalmette-Giierin,BCG)：卡-介（Calmette-Gerine）二氏将牛型结核杆菌培养于胆汁、甘油、马铃薯培养基，经230次传代，历时13年，其毒力发生变异，成为对人无致病性，而仍保持良好免疫性的菌株，接种人体后可获得对该菌的免疫力。第11页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三5、致病因子结核分支杆菌无内毒素、外毒素和侵袭性酶，其致病作用主要靠菌体成份，特别是胞壁中所含的大量脂质。脂质含量与结核杆菌的毒力相关，含量愈高毒力愈强。1、脂质（Lipide）占菌体干重20-40%，胞壁干重的60%，主要是磷脂、脂肪酸和蜡质，大多与蛋白质或多糖结合成复合物。①磷脂：刺激单核细胞增生，抑制蛋白酶的分解作用，使病灶组织溶解不完全，形成干酪样坏死。第12页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三②脂肪酸：在脂质中比重较大，其中6,6-二分枝酰-a,a‘-海澡糖(6,6-Dimycocyl-a,a’-D-trehalose)能破坏细胞线粒体膜，毒害微粒体酶类，抑制中性粒细胞游走和吞噬，引起慢性肉芽肿。具有该物质的结核杆菌毒株，在液体培养基中能紧密粘成索状，称为索状因子(cordfactor)。③蜡质D：为胞壁主要成分，是一种肽糖脂(Piptidoglycolipids)与分枝菌酸(My-colicacid)的复合物，能引起迟发型变态反应，并具有佐剂作用。第13页，讲稿共33页，2023年5月2日，星期三④硫酸脑苷脂(salfatides)和硫酸多酰基化海澡糖(Multiasiylatedtrehalos