胚胎植入前遗传学诊断.pptx

胚胎植入前遗传学诊断;内容概要;一、植入前遗传学诊断的概念;遗传病的生殖干预：;（1）定义

PGD

胚胎植入前遗传学诊断(PreimplantationGeneticDiagnosis)，又称为孕前遗传学诊断(preconceptiongeneticdiagnosis)。

指在胚胎植入前，利用DNA分析技术对显微活检的胚胎细胞进行染色体异常或遗传性疾病进行诊断，选择正常的胚胎植入。

PGS

胚胎植入前遗传学筛查(PreimplantationGeneticScreening)。

指胚胎植入着床之前，对早期胚胎进行染色体数目和结构异常的检测，当前指通过一次性检测胚胎23对染色体的非整倍体，挑选正常的胚胎植入子宫，提高患者正常的临床妊娠率，降低流产率，降低多胎妊娠率。;;PGD/PGS逐渐被PGT取代;PGT的分类和适应症;预防遗传性出生缺陷的积极性优生策略

克服宫内产前诊断所带来的选择性流产；

减少遗传性出生缺陷；

提高正常妊?率，降低自然流产率。;;（二） PGD/PGS的流程与相关技术;;;极体活检;卵裂球活检;囊胚活检;讨论：极体活检vs囊胚活检？;;;关键技术④：对全基因组扩增产物的全基因组测序; 关键技术⑤：SNP芯片技术 ;二、植入前遗传学诊断和筛查的临床应用;2017年8月，《自然》杂志以《中国积极推进更好的宝宝》为题，指出中国在通过积极实施孕前诊断技术帮助阻断遗传性疾病已经后来居上，处于全球领先地位

2016年中信湘雅进行了41000个IVF周期，约占美国总数的1/4。植入前检测的数

量在两年内增长了277%，从2014年的876例增加了2016年的2429例，其中700例为单基因病。诞生了中国首例“无癌宝宝”;技术流程;;2婚后6年不孕，我院检查时发现丈夫患有少、弱、畸精症，核型为13和14号染色体的罗氏易位携带者。活检了17枚胚胎，经诊断后有7枚平衡胚胎(正常或携带)，移植2枚胚胎，均获得了妊?。产前诊断染色体正常。出生了一对发育良好的孩子。;A;;一例相互易位携带者PGD，核型为：46,XY,t(6;10)(q13;p15)，活检2枚胚胎，对单卵裂球进行FISH检测，发现1枚信号正常，移植1枚，妊?单胎，产前诊断为正常核型，出生了正常婴儿。;单卵裂球FISH几种风险可能导致没有准确结果;

胚胎序号;FISH-PGD优点：

①安全、快速、灵敏度高；

②探针能较长时间保存；

③多色标记，简单直观；

④既可用于中期染色体又可用于间期细胞的分析;（二）全基因组扩增技术;WGA技术是一种对全部基因组序列进行非选择性扩增的技术，在相对没有序列倾向性的前提下大幅增加DNA拷贝。

① PEP:引物延伸预扩增(primeextensionpreamplification，1992年)

② DOP-PCR:变性寡核苷酸引物PCR(degenerateoligonucleotideprimedPCR，1992年)

③ MDA: 环状滚动扩增原理的多重置换扩增法 (multipledisplacementamplification，1998年)

④ MALBAC:多重退火环状循环扩增（multipleannealingandlooping-basedamplificationcycles,2012年);三类全基因组扩增方法的比较;1、CMA(Chromosomemicroarray)-PGD/PGS技术

CMA(Chromosomemicroarray)芯片包括aCGH和SNParray

ArrayCGH

BlueGenome公司24sure芯片

SNP芯片

Affymetrix公司250K，cyto750K,cytoHD芯片;易位携带者的SNP-PGD临床情况总结;;举例，相互易位的SNP分析。患者核型46,XY,t(8;18)(p11;q21)，活检4枚囊胚，第2枚胚胎正常，移植后成功妊?单胎，产前诊断为正常核型。;总结了2011年10月至2012年8月间169名罗氏易位和相互易位携带者共

773枚囊胚的SNP芯片结果及临床妊?情况。

52名罗氏易位，36名接受冻胚移植，妊?25例，临床妊?率69.4%；

127名相互易位，61名接受冻胚移植，妊?45例，临床妊?率73.8%。

通过较大样本数据比较，发现与FISH相比，SNP用于易位携带者，明显提高了临床妊?率;2、新一代测序技术(NGS)-PGD/PGS;我们与华大合作建立了单细胞水平的全基因组测序。

2012年8月诞生了世界首批由NGS-PGD助孕的健康婴儿。;Clinicalmeasures;;单基因遗传病PGD的部分共识;检测流程

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