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Saint-Bio
土壤N-乙酰■葡萄糖昔酶(S-NAG)活性检测试剂盒
(可见分光光度法)
产品货号:BA1952
产品规格:50T/24S
产品简介:
土壤N-乙酰书-D-葡萄糖昔酶(S-NAG)是土壤微生物分泌的溶酶体中的一种酸性水解酶。其活性变化与机体
某些病理状态密切相关。
S-NAG分解对硝基苯[3-N-乙酰氨基葡萄糖甘生成对-硝基苯酚,后者在400nm<最大吸收峰,通过测定吸光值
升高率来计算NAG活性。
S-NAG
P-Nitrobenzene-p-N-Acetygucosamine►P-Nitropheno(400nm)
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增
加样本量进行检测。
产品组成:
试剂名称规格保存条件
试剂一液体40mLx瓶2-8°C
试剂二粉剂x2瓶-20°C
试剂三液体60mLx瓶2-8°C
标准品液体ImLx支2-8°C
溶液的配制:
1.试剂二:临用前取1瓶加入4mL蒸馅水溶解,用不完的试剂-20°C分装保存4周;
2.标准品:5mmo/L的对硝基苯酚溶液。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、ImL玻璃比色皿、研钵、冰、30-50目筛、
蒸馅水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干或37°C烘箱风干,过30-50目筛。
二、测定步骤
1.分光光度计预热30min,波长调至400nm,蒸t留水调零。
2.标准溶液的稀释:临用前取20uL5mmo/L的对硝基苯酚溶液,加入980uL试剂一,充分混匀,配制成100u
mo/L标准液使用,现用现配。(实验中每管需要500UL,为减小实验误差,故配制大体积。)
3.加样表:
试剂名称(UL)测定管对照管标准管空白管
风干土样(g)0.10.1--
试剂一475475--
试剂二125---
混匀,于37°C水浴锅/恒温培养箱反应h后,立即沸水浴--
5min(盖紧,防止水分散失),流水/冰浴冷却
试剂二-125--
12000g25°C离心10min,取上清液
上清液500500--
标准品--500-
蒸馅水---500
试剂三1000100010001000
室温静置2min后,10000g常温离心5min,取上清测定400nm
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