动物人工授精.ppt

④抗冻作用：具有抗冷冻危害的作用。精液在冷冻过程中，精子内外环境的水分，必须经历液态和固态的过程，这种物态的转化对精子具有极大的危害。而抗冻物质有助于减轻或消除这种危害。一般常用于抗冻的保护物多采用甘油、糖类、二甲基亚砜（DMSO），TRIS等。⑤抗菌作用。在采精过程中即便在严格的操作下，也难免要受到某些细菌等有害微生物的污染，而精液和稀释液又都是病原微物良好的培养基。常用的抗生素有青霉素、链霉素、氨苯磺胺素、林肯霉素、多粘菌素等。第63页，讲稿共112页，2023年5月2日，星期三4.其它类物质①酶类：乳酸脱氢酶，细胞色素氧化酶，琥珀酸脱氢酶，β-葡萄糖苷酸酶，谷草转氨酶，过氧化氢酶，粘蛋白酶等。②激素：催产素，PGE2，PGF2α,T等。③维生素：VC,VB2,B12,VE等。酶类、激素类、维生素类等，有助于调节和改善精子外在环境的理化特性，以及母畜生殖道的生理机能，以利于提高受精机会，促进合子发育。④常温保存时通入CO2可延长保存时间。⑤在颗粒精液中加入染料用作标志等。第64页，讲稿共112页，2023年5月2日，星期三三、稀释液配制的注意事项1.消毒：配制好的稀释液，瓶口用硫酸纸包好，外用布盖上，扎紧，置高压锅中，0.8kg、105℃的压力维持30min；糖类稀释液只能用0.5kg的压力，或用水煮沸30min即可。2.用于配制稀释液以及封装保存精液的一切用品，都必须消毒，使用前再用稀释液冲洗2～3次。3.稀释液应新鲜、无菌，现用现配。4.在稀释液中加入卵黄、奶类及抗菌素等药物应在稀释液降温到35℃以下时再加入。5.稀释液加入卵黄和抗菌素前应过滤。0.02～0.2μm滤膜。6.成本低，配制方便，精子存活率高，受胎率高。第65页，讲稿共112页，2023年5月2日，星期三四、精液的稀释（一）稀释液的种类根据性质和用途可分为4类。1.现用稀释液：适用于采精后立即授精，以单纯扩大精液容量，增加输精母畜头数为目的。此类型稀释液以简单的等渗的糖类和奶类为主体。2.常温保存稀释液：适用于精液在常温下作短期保存，具有以糖类和弱酸盐为主体的pH偏低的特点。3.低温保存稀释液：适用于精液低温保存，具有含卵黄或奶液为主体的抗冷休克特点。第66页，讲稿共112页，2023年5月2日，星期三4.冷冻保存稀释液：适用于精液超低温冷冻保存，具有甘油、二甲亚砜等抗冻物质为主体特点，此类稀释液比较复杂，有仅一种稀释液组成，也有由多种稀释液组成。第67页，讲稿共112页，2023年5月2日，星期三（二）精液稀释的方法1.先将稀释精液所用的器具加温到30～35℃，并用等温稀释液冲洗2～3次（防止温度和渗透压的损害）。2.新采集的精液及时稀释，室温低于20℃时，要用精液无菌保温箱。精液放置时间过长则会降低精子活率，一般在0.5h内进行稀释。3.稀释液与精液的温度必须一致，可用消毒温度计测量。采精时集精杯加保温措施，稀释液预先加温到30℃左右，置于精液保温箱中。4.在稀释精液时，将稀释液沿杯壁缓缓加入精液中，一般将稀释液与精液置于预定温度的保温瓶中作等倍稀释处理。然后轻轻转动精液瓶或用灭菌棒搅动，使之混匀。第68页，讲稿共112页，2023年5月2日，星期三5.如果进行低倍稀释（3～5倍）可一次完成，若高倍稀释时则须分两步进行，即先低倍稀释，防止精子所处的环境突然改变，对精子造成打击。间隔1.5～2h后，精液降至保存（平衡）温度时，进行二次稀释。6.精液稀释后，先静置片刻，再做活率检查，如果活率没有变化，则分装保存。如果活率下降，则说明稀释或操作不当，不宜使用，并检查原因。第69页，讲稿共112页，2023年5月2日，星期三（二）稀释倍数精液的稀释应保证每输精剂量所含直线前进运动的精子数不低于输精标准要求。精液适宜的稀释液应根据以下依据决定：1.稀释液种类：糖类稀释液→低倍稀释，奶类稀释液→高倍稀释。2.保存时间：时间长→高倍稀释，时间短→低倍稀释。3.精液保存方法：冷冻保存稀释倍数应低一些，而液态保存稀释倍数可高些。4.畜种：羊、牛、鹿精子密度大，稀释的倍数应大一点，而猪、马密度小，则不宜作高倍稀释。第70页，讲稿共112页，2023年5月2日，星期三（三）每次输精保持受精力所需的最低有效精子数畜种牛山羊猪马稀释倍数10～402～42～42～3输精量（mL）0.2～10.5～130～4015～30有效精子数2000～5000万5000万2亿2.5～5亿牛：射精量8ml，活率0.7，密度12亿个/m