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实验动物的繁殖和保种;任务三实验动物遗传质量控制;项目对应的工作岗位群:
实验动物饲育员
实验动物遗传质量检测工作人员
;
步骤一
免疫学方法进行遗传监控;要求与目的:;二.设备和材料:
落地手术灯(装100W灯泡);三用水浴锅;药物天平。眼科剪刀和镊子;注射器(lml)和4号或6号针头;蜡盘或木板;脱脂棉球;载玻片。戍巴比妥钠;粉剂青霉素G钠(80万单位);无菌生理盐水。?;3%碘酒棉球和75%酒精棉球;涂有医用凡士林及粉剂青霉素G钠的纱布若干块(长150-200mm,宽40?-50mm,厚2-3层或长宽均为40-50mm)。将剪刀镊子、载玻片、注射器、纱布,脱脂棉等置于高压锅内121℃40分钟灭菌。;三.工作方法(1):;2根据不同品系动物对麻醉剂的不同敏感性,适当增减注射量。将麻醉后的动物固定在蜡盘或木板上,剪去被毛,以3%碘酒和75%精棉球消毒。从鼠背左右两侧各剪下直径5-10mm的皮肤各一块(一块用于自体移植,另一块用于异体移植)。;3将剪下的皮片(皮下组织向上)放在载玻片上,轻轻去掉皮下组织至真皮,并用无菌生理盐水?冲洗。两只动物的皮片,左片用于自体移植,右片以逆毛方向互相交换移植并使之吻合;4覆盖涂有凡士林和青霉素G的纱布块,并用纱布包札3-4圈,松紧适度。用毛笔沾上石膏糊(以40℃热水调成糊状)封闭,挂上标记卡片。一周后拆除石膏包札。; (1)拆除包札后,如皮片干瘪,脱落应视为移植技术失败。对照自体移植失败率不得大于10%。?皮片在移植后2-3周内被排斥,应视为急性排斥。其表现为皮炎、水肿、坏死、结痂直至脱落。
;(2) 异己遗传污染通常引起急性排斥。皮片在三周后被排斥,视为慢性排斥。其表现为逆毛脱落至无毛或留下凹掐疤痕。;(3)移植物是否慢性排斥至少观察100天,遗传突变通常引起慢性排斥。
(4)皮片在100天的观察期内,其逆毛始终生长者,则为永久接受的标志。;三工作方法(2);2用左手食指按住动物尾根,左手拇指按住尾尖,固定鼠尾并使其微微伸展,然后右手持解剖刀,?刃面朝前,避开尾静脉,与尾部皮肤成20-30夹角,在离尾根部5mm处削下一片宽约2-3mm,长约7-8?mm的皮肤,其厚度以创面有点状渗血为宜,或以能暴露出白色的肌键但又不割伤血管为宜。;右手将刀片逆时针方向转交左手,附着在刀片上的皮片相应转了180。用镊子取下皮片贴在原创面上,尽量使其吻合,在皮片上覆盖一片滤纸,轻轻按压后取掉滤纸片。该移植物作为自体移植对照。;3按2步骤,完成另4只动物的自体移植对照。参照互相循环皮肤移植系统(见下图)进行循环皮肤移植。;4取5支玻璃套管,分别套入动物尾巴至尾根部3mm处,用医用胶布将尾巴与套管贴往(贴2-3圈)?使套可轻微上下活动,但不脱落。套上玻璃管后,以落地手术灯照射15-30分钟,然后让动物以仰式放鼠盒,并挂上标记卡片。24小时后取下套管此时其皮片已贴在创而上。;5结果观察
同背部皮肤移植;四注意事项;五工作记录;六工作小结;1.大叶性(肺泡性)肺炎为肺实质炎症,通常累及肺大叶的全部或大部,并不累及支气管。病原体现在肺泡引起炎症,继之导致部分或整个肺段、肺叶发生炎症改变,致病菌多为肺炎链球菌。本病多见于青壮年,临床起病急,主要症状为寒颤高热、咳嗽、胸痛、呼吸困难和咳铁锈色痰。
2.小叶性(支气管)肺炎指病原体经支气管入侵,引起细支气管、终末细支气管和肺泡的炎症。病原体有肺炎链球菌、葡萄球菌、病毒、肺炎支原体以及军团菌等。常继发于支气管炎、支气管扩张、上呼吸道病毒感染以及长期卧床的危重病人。
3.间质性肺炎以肺间质炎症为主,病变累及支气管壁及其周围组织,有肺泡壁增生及间质水肿。可由细菌、支原体、衣原体、病毒或卡氏肺囊虫等引起。病因学分类
1.细菌性肺炎如肺炎链球菌(即肺炎球菌)、金黄色葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、肺炎克雷白杆菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌、埃希大肠杆菌、绿脓杆菌等。
2.非典型病原体所致的肺炎如军团菌、支原体和衣原体等。
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