化学检测技术课件.pptVIP

1第七章化学检测技术根据物质的化学性质而对物质进行定量、定性测定。应用最早、最广泛的检测技术简便、快速、操作容易

2一、糖类的化学检测糖类包括多糖、双糖、单糖单糖和某些双糖具有游离羰基——还原糖多糖和蔗糖等无还原性——非还原糖糖类化学检测主要是利用游离羰基的还原性质，与试剂（氧化剂）进行氧化还原反应而进行测定的。非还原糖必须转化为还原糖再进行测定

3最常用的试剂：斐林（Fehling）试剂基本组成：A：CuSO4溶液B:NaOH和酒石酸钾钠溶液使用时A、B等体积混合(生成酒石酸钾钠铜）酒石酸钾钠铜是氧化剂，可与还原糖的游离羰基发生氧化还原反应，而进行糖的测定。

4定糖常用方法1、兰—爱农（Lane-Eynon）法次甲基蓝（亚甲基蓝、四甲基蓝）法、（置换法、直接滴定法）反应终点用次甲基蓝指示剂显示（还原糖滴定斐林试剂，由于次甲基蓝氧化能力比二价铜弱，待二价铜全部还原后，过量1D还原糖使次甲基蓝还原，蓝色消失）多糖或其他非还原糖需转化为还原糖后再滴定如淀粉，可用酸解或酶解

5操作要点（1）斐林试剂的标定（a）标定预备试验A、B各5mL＋10mL水（250mL三角瓶中）摇匀，加热至沸腾，＋2D1％次甲基蓝溶液，用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失，耗标准葡萄糖液（0.1％或0.2％）V1mL。（b）标定A、B各5mL＋10mL水（250mL三角瓶中）摇匀，从滴定管中预先加入（V1-1)mL标准葡萄糖液，摇匀后加热至沸腾，＋2D1％次甲基蓝溶液，用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失（滴定在1min内完成），记录消耗标准葡萄糖液的总毫升数V0

6(2)定糖（a）定糖预备试验A、B各5mL＋10mL样品糖液（250mL三角瓶中）摇匀，加热至沸腾，＋2D1％次甲基蓝溶液，用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失，耗标准葡萄糖液（0.1％或0.2％）V2mL。（b）定糖A、B各5mL＋10mL样品糖液（250mL三角瓶中）摇匀，补加（V0-V2）mL水，并从滴定管中预先加入（V2-1)mL标准葡萄糖液，摇匀后加热加热至沸腾，＋2D1％次甲基蓝溶液，用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失（滴定在1min内完成），记录消耗标准葡萄糖液的总毫升数V。

92、碘量法I2→NaIO(氧化剂）其氧化能力较弱，仅适用于醛糖的测定，与酮糖不起反应操作要点：（1）标准硫代硫酸钠溶液配制，0.05mol/L，沸腾后冷却水配制，存放在棕色瓶中，一周后用标准重铬酸钾标定。（2）标准碘液配制，0.1mol/L（3）空白滴定：空白液，用硫代硫酸钠滴定试剂中全部碘

10碘量瓶中，10mL0.1mol/L碘液＋15mL0.1mol/LNaOH＋5mL空白液，摇匀后暗反应15min＋1mL1mol/L硫酸溶液，用0.05mol/L硫代硫酸钠滴定至浅黄色，加0.2mL0.5％淀粉液作指示剂，滴定至蓝色消失，记录V0(4)样品滴定：以5mL样品液代替空白液，V1(5)计算：醛糖含量＝（V0－V1）C×M×n注意：暗反应后需酸化再滴定，滴定时开始轻摇（碘挥发），后再摇（淀粉吸附碘）配合次甲基蓝法测定某些糖含量（如：果糖）

113、铜试剂法将还原糖与二价铜离子反应生成的Cu2O用碘氧化，再用硫代硫酸钠滴定反应液中剩余的碘而测定样品还原糖的含量。（1）铜试剂的配制主要提供二价铜离子及碘（2）标准曲线的制作

12(a)标准葡萄糖液的配制0.1%或0.05％（根据所用铜离子试剂定）(b)三角瓶编号123456葡萄糖标准液（mL)012345蒸馏水（mL)543210铜试剂（mL)555555沸水浴10min，冷却至室温,(c)各加入0.5mol/L硫酸5mL，振荡，待红色Cu2O完全溶解后，用硫代硫酸钠滴定至终点，记录耗用量V(d)绘标准曲线葡萄糖含量（mg）为纵坐标，（V0-V)为横坐标

13二、蛋白质和氨基酸的化学检测蛋白质含氮量几乎恒定，平均16％测出N含量×6.25，即为蛋白质量eg：含氮量每克N相当蛋白质量

肉、蛋、豆16％6.25面粉17.6％5.70奶品