- 1、本文档共50页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
?紫外分光光度计的使用原理(yuánlǐ)和方法;紫外-可见(kějiàn)分光光度法(ultraviolet-visiblespectrophotometry,UV-VIS)
;紫外-可见(kějiàn)分光光度法的特点:;§1.紫外-可见(kějiàn)吸收光谱;通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度(吸光度),以波长为横坐标,吸光度为纵坐标作图,得出该物质在测定波长范围(fànwéi)的吸收曲线。如图3-1;
在吸收曲线中,通常选用最大吸收波长λmax进行物质含量的测定。;2有机化合物的紫外-可见(kějiàn)吸收光谱;饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ→σ*,n→σ*跃迁,吸收峰一般出现(chūxiàn)在真空紫外区,吸收峰低于200nm,实际应用价值不大。
不饱合机化合物的电子跃迁类型为n→π*,π→π*跃迁,吸收峰一般大于200nm。
;生色团:是指分子中可以吸收光子而产生电子跃迁的原子(yuánzǐ)基团。人们通常将能吸收紫外、可见光的原子(yuánzǐ)团或结构系统定义为生色团。见表3-1和3-2。
;红移和紫移
;2.2有机化合物的吸收(xīshōu)带;3无机化合物的紫外-可见(kějiàn)吸收光谱
;过渡金属的电子跃迁类型(lèixíng)为d电子在不同d轨道间的跃迁,吸收紫外或可见光谱。这些峰强烈受配位环境的影响。
例如cu2+以水为配位体,吸收峰在794nm处,而以氨为配位体,吸收峰在663nm处。此类光谱吸收强度弱,较少用于定量分析。;3.电荷迁移(qiānyí)光谱某些分子既是电子给体,又是电子受体,当电子受辐射能激发从给体外层轨道向受体跃迁时,就会产生较强的吸收,这种光谱称为电荷迁移光谱。如苯酰基取代物在光作用下的异构反应。;1.4影响紫外-可见吸收光谱(xīshōuɡuānɡpǔ)的因素
;2.溶剂
注意如下几点:
(1)尽量选用低极性溶剂;
(2)能很好地溶解被测物,并且形成(xíngchéng)的溶液具有良好的化学和光化学稳定性;
(3)溶剂在样品的吸收光谱区无明显吸收。
3.pH值;1.5紫外-可见吸收光谱(xīshōuɡuānɡpǔ)的应用;2.纯度的鉴定
用紫外吸收光谱确定试样(shìyànɡ)的纯度是比较方便的。
如蛋白质与核酸的纯度分析中,可用A280/A260的比值,鉴定其纯度。;3.结构分析
紫外-可见吸收光谱一般不用于化合物的结构分析,但利用紫外吸收光谱鉴定化合物中的共轭结构和芳环结构还是有一定价值。
例如,某化合物在近紫外区内无吸收,说明该物质(wùzhì)无共轭结构和芳香结构。;§2.朗伯-比尔定律(dìnglǜ)
;吸光度(guāngdù):为透光度倒数的对数,用A表示,
即
A=lg1/T=lgI0/It
;二、朗伯-比尔定律
朗伯-比尔定律:当一束平行单色光通过(tōngguò)含有吸光物质的稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比,即
A=κcl
式中比例常数κ与吸光物质的本性,入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度,l为透光液层厚度。
;三、吸光系数(xìshù);
当l以cm,c以mol/L为单位(dānwèi),κ称为摩尔吸光系数,用ε表示。
您可能关注的文档
- 矢量网络分析仪的使用说明方法.docx
- 知了背调使用手册17版.pptx
- 短视频从业者必备指南.pptx
- 矮壮素使用方法.docx
- 矮壮素的作用-矮壮素的使用方法.doc
- 矮壮素的使用方法.doc
- 矿井瓦斯检查仪操作使用方法.pptx
- 研修手册使用详细说明.pptx
- 磁力泵使用操作方法.docx
- 磁粉测功机使用基础手册.doc
- 全国青少年(毒品预防教育)知识考试题库与答案 .pdf
- 2023年山东胶州市领军计划自主招生历史试题真题(含答案详解) .pdf
- 【人教版八年级生物】第六单元 第二章 认识生物的多样性 .pdf
- 冀人版-第三单元 电(提升卷)-四年级科学上册单元培优进阶练.docx
- 新郑市事业单位统考真题 .pdf
- 冀人版-第三单元动物的生长与繁殖(单元测试)四年级下册科学.docx
- CLCN4基因变异相关癫痫的临床表型及基因变异特点 .pdf
- 【《“双减”背景下小学中年级语文自主阅读策略探究》6500字】 .pdf
- 高一语文开学第一课+课件+2024-2025学年统编版高中语文必修上册 .pdf
- 密山市事业单位统考真题 .pdf
文档评论(0)