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红细胞膜蛋白结构测定
（红细胞抗体）
方法
流式细胞仪（BeckmanCoulter，贝克曼库尔特）
原理：
直接免疫荧光法。FITC标记的各型多克隆抗体，加到全血中，与红细胞膜上的相应的IgG-Fc片段结合，经过洗涤（和固定）等步骤后，在流式细胞仪上进行分析。
标本采集与处理
受检者的准备检查对象生活饮食处于日常状态，空腹采血。
采集部位 静脉采血
抗凝剂 EDTA或肝素抗凝血
要求 1.样本量至少1ml。
样本应在采集后6小时内处理，冷冻的标本不能用。
溶血样本不能用。
试剂
品牌联科
剂型
规格
贮存
成分1:单克隆抗体
液体
1ML
2—8C
2：全血溶血试剂
液体
A：甲酸
液体
70ML
室温
B：碳酸钠等
液体
32ML
室温
C：多聚甲醛
液体
14ML
室温
3：鞘液
液体
20L
室温
4：清洗液
液体
5L
室温
5：荧光微球
液体
10ML
2-8C
质控品BEKAMANCOULTER产品，未开瓶的试剂于2-8°C保存，可在有效期内保持稳定，稀释的试剂于2-8C可稳定2周；每天校准一次：遇特殊情况随时进行校准。
仪器
BeckmanCoulterEPICSXL/FC500/Altra
操作：
1） 按照要求，分别向已编好号的试管中加入10ul单克隆抗体和同型对照（IgG-FITC）
2） 分别向试管中加入混匀的100u1抗凝血（1：200稀释后）。
3） 混匀，避光，室温孵育20-30分钟
4） 上机测样
报告结果
报告百分数
操作性能
精密度 批内五次重复CV2%
灵敏度500—1000个荧光素分子
参考值
IgG2.98%IgD2.88%
IgG2.98%
IgD2.88%
IgM2.52%
临床意义
自身溶血性贫血的分型诊断
方案（Protocol）
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