糖尿病动物模型建立.docx

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TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"I型糖尿病模型建立 1

链脲佐菌素 4

四氧嘧啶 5

\o"CurrentDocument"II型糖尿病模型建立 6

建模方法 6

胰岛素抵抗动物模型 7

\o"CurrentDocument"参考文献 8

糖尿病动物模型建立

摘要：本文通过收集相关文献总结糖尿病模型的建立方法。

关键词：糖尿病模型，鼠

前言：

在生物医学研究的进展过程中常常依赖于使用动物模型作为实验假说和临床假说两者的试验基础，主要有以下几个优点：1.避免了在人身上进行试验所带来的风险，包括伦理学上的相关问题2.可以严格控制实验条件，增强实验材料的可比性4.可以简化实验操作和样品收集。从实用性出发，本文重点介绍大鼠诱发性糖尿病模型的建立。

科技前沿：

日本东京大学的研究人员在新研究中发现一种名为AdipoRon化合物，它能够减轻吃高脂肪食物的小鼠和遗传性肥胖小鼠的胰岛素抗性和葡萄糖耐受不良［8］。中科院：发现了2型糖尿病重要的早期生物标记物［9］，也有学者认为可以用果蝇制作人体糖尿病模型，不过相关报道较少［11］,

乌克坦(Yucatan)〔14〕小型猪(亦称墨西哥无毛猪)也是糖尿病研究中一个很好的动物模型，只需一次静脉注射水合阿月尿(alloxanmonohydrate)200mg/kg体重，就可以产生典型的急性糖尿病。其临床体征包括高血糖、剧渴、多尿和酮尿等。［12］

灵长类动物猕猴，主要用于病因学、遗传学、神经系统、细胞生化及药物鉴定等方面研究，这样的动物模型，研究人类糖尿病会更接近自然，结果也比较理想，但因价格昂贵，难以得到，国内较少使用。［13］

I型糖尿病模型建立

1.1手术切除胰腺

手术切除胰腺后，动物缺乏胰岛素而出现高血糖。全部切除胰腺，可制成无胰性糖尿病动物模型，需补充外源性胰酶。全部切除胰腺，除可引起高血糖外，并可致酮症酸中毒和死亡，故一般主张切除75%?90%的胰。

1.2病毒诱导

胸心肌炎病毒D变异体和M变异体均致糖尿病肾病的作用，对其敏感的的动物品系有DBA及DBA/2小鼠，其作用机制与其感染动物后破坏胰岛6细胞有关。许多病毒对B细胞都存在潜在的损伤，它们的分子机制差异很大，有速发的或慢性的自身免疫破坏，如柯萨奇病毒、风疹病毒、流行性腮腺炎病毒、巨细胞病毒、逆转录病毒等?LondonoE"等用Kilham大鼠病毒造模时，同时用小剂量地塞米松，有效的阻止了B细胞的自身免疫破坏的，提出1型糖尿病预防的新思路?[1][5]

1.3化学药物诱导

1.3.1.1链脲佐菌素

链月尿佐菌素(Streptozotocin,STZ)结构中亚硝基月尿是细胞毒，去氧葡萄糖部分使之易于进入6细胞。其损伤6细胞的机制可能与以下几个方面有关：①STZ直接破坏胰岛6细胞，有学者认为，SAZ首先损伤6细胞及有关细胞器膜结构导致酶的扩散和酶活性改变，进而影响6细胞功能和结构的改变。

STZ激活自身免疫过程，进一步导致细胞损害，常见于多次小剂量注射。

遗传因素的影响，有学者针对STZ损伤胰岛6细胞分子水平作用机制研究认为，其毒性作用首先是将DNA碱基上的特殊位点烷基化，再作用于ADP核糖体合成酶，从而损伤6细胞。④通过一氧化氮NO和自由基两种途径损伤胰岛6细胞。STZ对实验动物的胰岛细胞具有高度选择性毒性作用。STZ原本是一种光谱抗菌素，具有抗菌、抗肿瘤性能的同时亦有通过特异性损伤胰岛6细胞诱发糖尿病的副作用，高剂量STZ致动物胰岛6细胞坏死而无胰岛炎发生，诱导动物发生I型糖尿病，方法简便、用药量小，、特异性损伤6细胞、药物毒性较低。[1][2]

1.3.1.2建模方法

①Wistar大鼠（体重200?300g）—次性大剂量或多次小剂量腹腔或静脉注射STZ（60?80mg/kg，临用前溶于PH4.5,0.1mg/L枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液中），72小时后出现血糖稳定升高，三多症状（多饮、多食、多尿）明显，检测血糖在11.1mmol/L时，即制成无炎性I型糖尿病模型。主要形态学改变：胰岛萎缩、形状不完整，细胞数量减少，细胞肿胀、退变、凋亡。随着病程的延长逐渐加重，并不同程度胰岛纤维化。免疫组化染色显示，胰岛6细胞数量明显减少，甚至无6细胞，以细胞数量明显增多。[2]

STZ称量后溶解于pH4?5、浓度为0?1mol/L的柠檬酸一柠檬酸钠缓冲液，配制成1%的溶液，避光放置，5min内给与造模小鼠。小鼠腹腔注射STZ每次100mg/（kg?bw），间隔1d后再注射一次，制备T1DM模型，末次注射STZ后第3天起采鼠尾静脉血测定随机血糖[13]值，然后每隔