磁珠分离细胞技术1220课稿.pptx

;磁珠分选技术;·磁珠

·磁力架

·分离柱或分离试管

MACS，Dynal，BD，StemCell，RD…;管式分选;5;;未标记的细胞先行流出;·MACS

d≈50nm，多聚糖和氧化铁组成的超顺磁化微粒；可被细胞生物降解而无需解离磁珠；分离丰度极小的细胞(10-8);

Dynal

d=4.5um﹑2.8um﹑1um，多聚材料包被的氧化铁超顺磁微球；均一性好；也适用于细胞活化；

BD

d≈200nm，超顺磁化微粒；包被了高质量的BD抗体；

StemCell管式；柱式;

RD

d≈150nm，链酶亲和素磁珠，类胶体.;直标;在没有直接标记微珠可选时

使用自备抗体或配体的磁性分选中

分选或去除用多个抗体混合物标记的多种细胞

分选稀有细胞和抗原弱表达的细胞;分选策略;用磁珠标记目标细胞;分选前;非目的细胞磁性标记后，作为阴性的组分滞留在分选柱上，未标记的目的细胞被分选出来。;生物素标记CD2,CD14,CD16,CD36,CD43,

CD235a;再加入链酶亲和素标记的磁珠;16;17;洗脱目标细胞;应用：分选人外周血中的CD3+CD56+ T细胞;·优点：操作简单，高效快捷，无菌和细胞状态更有保证，回收率、纯度高。

·缺点：不能在分选的同时进行分析，分选过程中很难去除死细胞团块的干扰，难于同时进行多种标记物的分选。;分选前标本处理

密度梯度离心(Ficoll, Percoll)

（根据情况）溶血(溶解红细胞)

过滤(单个细胞)

分选标本：不含有死细胞或者碎片的单细胞悬液

骨髓、外周血、脐带血提取的单个核细胞

处理的组织细胞

培养的细胞

全血*（autoMACS）;·选择合适的分选策略！