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正相色谱:流动相的极性小于固定相反相色谱:流动相的极性大于于固定相吸附色谱:硅胶、氧化铝、活性碳分配层析:纸层析气相色谱手性色谱凝胶色谱:葡聚糖凝胶高效液相色谱(HPLC)色谱法超临界流体萃取(SupercriticalFluidExtraction,SFE)●是一种提取天然物质成分的新技术;●改变气体(常用CO2)的温度、压力,使其处于超临界状态,形成一种介于液体和气体之间的流体。它不仅有较高的溶解能力和选择性,而且通过调节温度、压力即可从萃取物中将CO2分离出去。●CO2无毒、无臭、不燃、廉价易得,无论从成本和提取的产品质量都比其它方法有利。超临界CO2萃取天然药物的萃取装置A.CO2钢瓶B.液化器C.高压计量泵D.加热釜E.萃取釜F.分离ⅠG.分离Ⅱ1.2.3.4阀门结构测定的程序纯度鉴定推测母体结构类型功能基情况分子量分子式的确定波谱、化学方法推测出结构式人工合成进行确认seePage41纯度确定--最基本的条件检查纯度的方法:?外观、颜色、形态是否均一;?测定各种物理常数,如熔点、沸点、比旋光度、折光率等,这些物理常数都反映了化合物的纯度。?如果可能是已知物,用已知结构的对照品进行对照测定或测定它们的共熔点等,?也可对照文献报导值(注意各种测定条件的一致性)?薄层层析(三种展开系统和三种显色方法)?高效液相层析,确定分子式,计算不饱和度1、元素定量分析配合分子量测定钠融法质谱法2、同位素丰度比法3、高分辨质谱(HR-MS)法4、计算不饱和度化学方法—辅助手段●某些成分或功能基,可以和一些特定试剂产生各种颜色或沉淀,有助于判断化合物类型和功能基:?生物碱类大都能和生物碱沉淀试剂产生沉淀;?羟基葸醌类遇碱呈红色;?盐酸一镁粉试剂能和许多黄酮类化合物呈色,●鉴别功能基的化学反应:?三氯化铁反应、三氯化铝反应等等。?利用在酸水或碱水中的溶解度情况,提示该化合物碱性功能基或酸性功能基的存在以及有无内酯、内酰胺结构。化学方法—辅助手段●化学降解法将复杂分子通过氧化、还原等化学反应,降解为几个结构比较简单又稳定的小分子化合物,通过对降解产物的结构鉴定,再按降解机理合理地推导出原来可能的化学结构式;●特点:?需用化合物量大;?反应剧烈;?主要产物得率少又费时;现在较少应用,仅保留一些比较简单规律性又较强的降解反应●衍生物制备用化学方法研究结构的一种常用手段,对结构推定有一定意义;波谱方法—主要手段UVIRMSNMR四大光谱光谱紫外光谱:用波长在200-400nm之间的连续光扫描记录下来的图谱,吸收带比较宽;红外光谱:用波长在800nm-20?m之间的连续光扫描记录下来的图谱,谱线比较尖锐;紫外光谱(Ultra-Violet,UV)测定范围:波长200~400nm之间,作用:?提供基本骨架信息;?样品中杂质的测定?定量分析特点:?液态样品才能测定;?常规紫外光谱仪价格低廉;?样品用量少(只需5-10?g)生色团:产生紫外吸收的不饱和基团,如C=C,C=O,O=N=O等;助色团:其本身是饱和基团(常含有杂原子),它连到生色团上时,能使后者吸收波长变长或吸收强度增加,如-OH,-NH2,-Cl等;深色位移:由于基团取代或溶剂效应,最大吸收波长变长,也叫红移(redshift);浅色位移:由于基团取代或溶剂效应,最大吸收波长变短,也叫蓝移(blueshift);紫外光谱(Ultra-Violet,UV)的重要概念发展迅猛的原因-技术进步●如利血平(reserpine),5年时间(1952~1956)●现在只要短短几年的时间甚至几天的时间,且所需要的样品量也减少分子量小于1000,只需1mg的样品蛇木中成分,降压结构复杂的大分子研究方向及发展趋势●微量物质●水溶性物质●不稳定物质●海洋生理活性物质●生物体内源性生理活性物质目的从中发现新的化合物或者新的骨架类型天然药物化学成分的划分●从物质基本类型分:
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