菌落总数与大肠菌群数测定演示文稿.pptVIP

初染本文档共41页；当前第30页；编辑于星期六\16点46分媒染本文档共41页；当前第31页；编辑于星期六\16点46分脱色本文档共41页；当前第32页；编辑于星期六\16点46分复染本文档共41页；当前第33页；编辑于星期六\16点46分革兰氏染色阴性革兰氏染色阳性革兰染色法本文档共41页；当前第34页；编辑于星期六\16点46分复发酵器材与试剂培养24小时后的伊红美兰平板、酒精灯、接种环、复发酵管本文档共41页；当前第35页；编辑于星期六\16点46分大肠菌群数测定实验步骤3.复发酵（1）选取鉴定为无芽孢G-杆菌的菌落1-3个（2）接种至10ml乳糖蛋白胨培养液（3）培养：37℃，24h（4）观察指标：产酸，产气本文档共41页；当前第36页；编辑于星期六\16点46分液体接种本文档共41页；当前第37页；编辑于星期六\16点46分复发酵复发酵阳性结果，培养基变成黄色，小倒管内有气体产生本文档共41页；当前第38页；编辑于星期六\16点46分大肠菌群数测定注意事项：1.无菌操作2.吸管使用3.洗去染液的方法4.显微镜保养5.液体接种本文档共41页；当前第39页；编辑于星期六\16点46分MPN法原理MPN法（MostProbableNumberMethod）目的：对某种细菌进行选择性计数核心思想：泊松分布实施方法：多次稀释直至无菌，每个稀释度分别接种若干培养管，根据阳性管数估算MPN值本文档共41页；当前第40页；编辑于星期六\16点46分MPN法原理MPN法（MostProbableNumberMethod）1.细菌进入发酵管的概率近似服从泊松分布:P(x=k)=e-x×xk/k!x:细菌浓度，k:进入发酵管的细菌数2.若在n管发酵中，令接种水样量为Vi，阳性管数为Pi，阴性管数为Qi，则该检验结果发生的概率为：其中C为常系数V为总水样量，x为细菌个数本文档共41页；当前第41页；编辑于星期六\16点46分菌落总数与大肠菌群数测定演示文稿本文档共41页；当前第1页；编辑于星期六\16点46分菌落总数与大肠菌群数测定本文档共41页；当前第2页；编辑于星期六\16点46分主要内容菌落总数测定大肠菌群测定MPN法原理（拓展内容）本文档共41页；当前第3页；编辑于星期六\16点46分菌落总数测定掌握菌落总数测定方法实验原理 不同稀释度的样品，营养琼脂培养基，36℃，48h（水产品30℃，72h），菌落数本文档共41页；当前第4页；编辑于星期六\16点46分菌落总数测定器材与试剂：样品，无菌生理盐水，平板计数琼脂培养基，1ml吸管，培养皿本文档共41页；当前第5页；编辑于星期六\16点46分菌落总数测定本文档共41页；当前第6页；编辑于星期六\16点46分倾注培养本文档共41页；当前第7页；编辑于星期六\16点46分培养结果本文档共41页；当前第8页；编辑于星期六\16点46分菌落总数测定实验步骤5.菌落计数：肉眼观察，可用放大镜，可标记必要时分区计数，菌落成片者作废计算方法某稀释度的菌落数：两平板菌落数取平均值选择菌落数在30-300之间的稀释度（1）仅有一个稀释度在此范围：菌落数×稀释倍数本文档共41页；当前第9页；编辑于星期六\16点46分菌落总数测定计算方法：（2）有两个稀释度在30-300之间菌落数之比2，选较小值菌落数之比2，取平均值（3）所有稀释度均300取稀释倍数最大者（4）所有稀释度均30取稀释倍数最小者（5）没有任何稀释度在30-300之间选最接近该范围者结果单位：CFU/ml（g）本文档共41页；当前第10页；编辑于星期六\16点46分菌落总数测定注意事项：1.无菌操作2.标记3.何时更换吸管4.吸吹混匀5.琼脂培养基保