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本发明公开了一种含有低复杂度结构域蛋白的表达纯化方法,包括步骤:一、构建融合蛋白的表达载体:目的蛋白的N‑端依次连接6×His标签、MBP标签、标签切除蛋白酶识别序列、接头序列;二、将含有融合蛋白编码序列的载体转入大肠杆菌诱导表达“6×His‑MBP‑标签切除蛋白酶识别序列‑接头‑目的蛋白”融合蛋白,诱导表达后收集细胞;三、重悬及破碎细胞;四、蛋白纯化:包括步骤:(1)MBP柱亲和层析:(2)肝素柱亲和层析:(3)尺寸排阻色谱纯化;(4)融合蛋白切割标签后尺寸排阻色谱纯化。本发明方法通过联合使用
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 117143252 A
(43)申请公布日 2023.12.01
(21)申请号 202311094058.2
(22)申请日 2023.08.29
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