梨矮化性状的DNA分子标记及品种遗传多样性研究.doc

优秀论文 梨矮化性状的DNA分子标记及品种遗传多样性研究 关键词：梨 矮化性状 DNA分子标记 品种遗传 杂交育种 亲缘关系 摘要：本研究以‘矮化梨’(Pyrus communis Linn.)与‘茌梨’(Pyrus bretschneideri Rehd.)的杂交后代群体(共111个单株)为试材，采用分离群体分组分析法(Bulked Segregate Analysis，BSA)，对来自西洋梨的矮化突变基因(pcDw)进行了DNA分子标记研究。另外，利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术，探讨了21个栽培品种间的亲缘关系，同时，对8个沙梨主栽品种进行了DNA指纹鉴定。 获得如下研究结果： 1．通过对412条随机引物的BSA筛选，获得了两个与梨矮化性状基因(pcDw)相连锁的RAPD标记：S1172amp;lt;,-940amp;gt;、S1212amp;lt;,-318amp;gt;。它们与pcDw基因间的连锁距离分别为8.2cM 和7.2cM。这两个RAPD标记均被转换成了SCAR(Sequence Characterized Amplified Region)标记，即SCARamp;lt;,-940amp;gt;和SCARamp;lt;,-318amp;gt;。这一研究结果，为与矮化性状相连锁标记的遗传图谱构建提供了依据。 2．通过对44对来自梨或苹果的SSR引物的筛选，获得了一个与pcDw基因相连锁的SSR标记KA14。该标记与pcDw基因的连锁距离为14.8cM。 3．从40个随机引物中筛选出了33个多态性好的引物，在21个栽培品种间进行了RAPD分析，最终得到339个清晰稳定的扩增位点，其中多态性位点为292个，占86.1％。利用UPGMA(非加权配对算术平均)法进行了品种间相似系数的计算以及聚类分析，揭示了这些品种间遗传上的差异程度。将21个品种在阈值0.6400-0.6560处分为六类。 4．用RAPD标记技术对8个沙梨(Pryus pyrifolia Nakai)主栽品种的DNA指纹进行了分析，从33个10碱基随机引物中筛选出了两个多态性高的引物S2075和S1296，它们的扩增位点分别为11个和10个。根据这两个引物中任何一个的扩增图谱均可以将八个品种区分开来。 正文内容 本研究以‘矮化梨’(Pyrus communis Linn.)与‘茌梨’(Pyrus bretschneideri Rehd.)的杂交后代群体(共111个单株)为试材，采用分离群体分组分析法(Bulked Segregate Analysis，BSA)，对来自西洋梨的矮化突变基因(pcDw)进行了DNA分子标记研究。另外，利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术，探讨了21个栽培品种间的亲缘关系，同时，对8个沙梨主栽品种进行了DNA指纹鉴定。 获得如下研究结果： 1．通过对412条随机引物的BSA筛选，获得了两个与梨矮化性状基因(pcDw)相连锁的RAPD标记：S1172amp;lt;,-940amp;gt;、S1212amp;lt;,-318amp;gt;。它们与pcDw基因间的连锁距离分别为8.2cM 和7.2cM。这两个RAPD标记均被转换成了SCAR(Sequence Characterized Amplified Region)标记，即SCARamp;lt;,-940amp;gt;和SCARamp;lt;,-318amp;gt;。这一研究结果，为与矮化性状相连锁标记的遗传图谱构建提供了依据。 2．通过对44对来自梨或苹果的SSR引物的筛选，获得了一个与pcDw基因相连锁的SSR标记KA14。该标记与pcDw基因的连锁距离为14.8cM。 3．从40个随机引物中筛选出了33个多态性好的引物，在21个栽培品种间进行了RAPD分析，最终得到339个清晰稳定的扩增位点，其中多态性位点为292个，占86.1％。利用UPGMA(非加权配对算术平均)法进行了品种间相似系数的计算以及聚类分析，揭示了这些品种间遗传上的差异程度。将21个品种在阈值0.6400-0.6560处分为六类。 4．用RAPD标记技术对8个沙梨(Pryus pyrifolia Nakai)主栽品种的DNA指纹进行了分析，从33个10碱基随机引物中筛选出了两个多态性高的引物S2075和S1296，它们的扩增位点分别为11个和10个。根据这两个引物中任何一个的扩增图谱均可以将八个品种区分开来。 本研究以‘矮化梨’(Pyrus communis Linn.)与‘茌梨’(Pyrus bretschneideri Rehd.)的杂交后代群体(共111个单株)为试材，采用分离群体分组分析法(Bulked Segregate Anal