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一、肽链合成起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。 本文档共69页;当前第30页;编辑于星期三\11点4分 (一)原核生物翻译起始复合物形成 核蛋白体大小亚基分离; mRNA在小亚基定位结合; 起始氨基酰-tRNA的结合; 核蛋白体大亚基结合。 本文档共69页;当前第31页;编辑于星期三\11点4分 IF-3 1. 核蛋白体大小亚基分离 非功能性的70S核糖体在IF3的作用下发生解离,生成IF3·30S复合物和游离的50S大亚基 本文档共69页;当前第32页;编辑于星期三\11点4分 A U G 5 3 IF-3 IF-1 2. mRNA在小亚基定位结合 IF3·30 S复合物与mRNA模板相结合,在此过程中IF–1 占据A位防止结合其他tRNA,IF–3则可阻止50 S大亚基过早结合,帮助mRNA的SD序列与16S rRNA3’‐端相结合,使mRNA正确定位,并在翻译启动区形成使起始信号易被fMet–tRNA fMet识别的高级结构 本文档共69页;当前第33页;编辑于星期三\11点4分 IF-3 IF-1 IF-2 GTP 3. 起始氨基酰tRNA( fMet-tRNAimet )结合到小亚基 A U G 5 3 在IF1、IF2 GTP的帮助下,fMet–tRNA fMet进入小亚基的P位,tRNA上的反密码子与mRNA上的起始密码子配对 本文档共69页;当前第34页;编辑于星期三\11点4分 IF-3 IF-1 IF-2 GTP GDP Pi 4. 核蛋白体大亚基结合,起始复合物形成 A U G 5 3 甲酰甲硫氨酰tRNA就位后,起始因子IF–3就脱离小亚基,随着IF–3的脱落,核蛋白体50 S大亚基与小亚基结合成70 S起始复合物,甲酰甲硫氨酰tRNA占据P位,与此同时GTP水解,IF–1和 IF–2脱离起始复合物。 本文档共69页;当前第35页;编辑于星期三\11点4分 IF-3 IF-1 A U G 5 3 IF-2 GTP IF-2 -GTP GDP Pi 已知IF–2对于30 S起始复合物与50 S亚基的连接是必需的,而IF–1则在70 S起始复合物生成后促进IF–2的释放,从而完成蛋白质合成的起始过程。 本文档共69页;当前第36页;编辑于星期三\11点4分 本文档共69页;当前第37页;编辑于星期三\11点4分 (二)真核生物翻译起始复合物形成 核蛋白体大小亚基分离; 起始氨基酰-tRNA结合; mRNA在核蛋白体小亚基就位; 核蛋白体大亚基结合。 本文档共69页;当前第38页;编辑于星期三\11点4分 二、肽链合成延长 指根据mRNA密码序列的指导,次序添加氨基酸从N端向C端延伸肽链,直到合成终止的过程。 肽链延长在核蛋白体上连续性循环式进行,又称为核蛋白体循环(ribosomal cycle),每次循环增加一个氨基酸,包括以下三步: 进位(entrance) 成肽(peptide bond formation) 转位(translocation) 本文档共69页;当前第39页;编辑于星期三\11点4分 原核延长因子 生物功能 对应真核延长因子 EF-Tu 促进氨基酰-tRNA进入A位,结合分解GTP EF-1-α EF-Ts 调节亚基 EF-1-βγ EFG 有转位酶活性,促进mRNA-肽酰-tRNA由A位前移到P位,促进卸载tRNA释放 EF-2 肽链合成的延长因子 本文档共69页;当前第40页;编辑于星期三\11点4分 原核延长因子 生物功能 对应真核延长因子 EF-Tu 促进氨基酰-tRNA进入A位,结合分解GTP EF-1-α EF-Ts 调节亚基 EF-1-βγ EFG 有转位酶活性,促进mRNA-肽酰-tRNA由A位前移到P位,促进卸载tRNA释放 EF-2 肽链合成的延长因子 本文档共69页;当前第41页;编辑于星期三\11点4分 (一)进位 起始复合物形成以后,第二个AA–tRNA在延伸因子EF-Tu及GTP的作用下,生成AA–tRNA·EF-Tu·GTP复合物,然后结合到核糖体的A位上,同时GTP被水解成GDP和Pi 本文档共69页;当前第42页;编辑于星期三\11点4分 Tu Ts GTP GDP A U G 5 3 Tu Ts GTP 本文档共69页;当前第43页;编辑于星期三\11点4分 (二)成肽 在肽基转移酶的催化下,P位上的fMet–tRNA fMet活化的羧基从相应的tRNA上解离下来,并转移到A位氨酰–tRNA的氨基酸的氨基上形成肽键,产生肽酰– tRNA
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