几种无机离子和有机小分子对黄孢原毛平革菌的酶活性影响分析.docxVIP

几种无机离子和有机小分子对黄孢原毛平革菌的酶活性影响分析.docx

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摘要:以黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)为代表的白腐真菌,其分泌的木质素过氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP)等酶系能降解木质素以及前体类似物。对几种无机金属离子、无机阴离子、有机小分子对黄孢原毛平革菌所产酶系中的木质素过氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP)的酶活性影响进行了分析。结果表明,Fe3+对木质素过氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP)都有很强的抑制作用,Fe2+、Ca2+对木质素过氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP)表现出不同的促进作用,Br-比Cl-的激活作用稍弱;在添加乙二胺四乙酸(EDTA)或抗坏血酸的条件下,限氮培养比富氮培养更能提高出发菌株和诱变菌株的酶活力。 关键词:黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium);木质素过氧化物酶;锰过氧化物酶;酶活力 Impact of Inorganic Ions and Organic Small Molecules on Enzymatic Activity of Phanerochaete chrysosporium CHEN Ying,YANG Wei-qiu,QIU Xue-lin,LIN Hui-fei (Suzhou Polytechnic Institute of Agriculture, Suzhou 215008, Jiangsu, China) Abstract:As the representative of White-rot Fungus,Phanerochaete chrysosporium can secrete Lignin peroxides and Manganese peroxides and so on,which can depredate Lignin and Precursor analogs. Through using Inorganic ions and Organic molecules as Activator, enzyme activity in different conditions was researched.The results show that Fe3+ on LiP and MnP had strong inhibitory effect,but Fe2+ and Ca2+ on those showed different promoting effect. Br- can improve the enzyme activity better than Cl-. In addition of EDTA or ascorbic acid conditions,the nitrogen limited culture than nitrogen rich culture can improve the enzyme activity of the strains. Key words:Phanerochaete chrysosporium;lignin peroxides;manganese peroxides;enzymatic activity 木质素是一类以苯丙烷为基本结构单元构成的复杂的芳香族高分子化合物,广泛存在于植物细胞中,是地球上仅次于纤维素的最为丰富的有机再生资源。木质素在植物体内通过化学键和半纤维素连接,然后包裹在纤维素外,形成木质纤维素。木质素由于具有各种生物学稳定的复杂键型而不易被微生物降解。要解决如何高效利用木质纤维素这一问题,关键在于如何降解包裹在纤维素晶体外面的木质素以及半纤维素,从而增加纤维素表面积,使纤维素易于降解和利用[1]。随着人类可利用资源的越来越紧缺,木质素的微生物降解成了当今研究的热点。白腐真菌作为已知的惟一可独立降解木质素的微生物,其能分泌木质素过氧化物酶(LiP)、锰过氧化物酶(MnP)和漆酶(Laccase)等酶降系统[2-8]。黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)是常见的白腐真菌之一,在其整个生长阶段中,木质素过氧化物酶的合成量要比锰过氧化物酶大得多,其在木质素降解中起主要作用。几乎所有的木生白腐菌和各种土壤中的枯叶分解真菌都能产生锰过氧化物酶,其是最为普遍的木质素修饰过氧化物酶[9-11]。 本试验研究了几种无机金属离子、无机阴离子、有机小分子对黄孢原毛平革菌所产酶系中的木质素过氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP)的酶活性影响,以期为大规模应用提供一定的参考数据。 1 材料与方法 1.1 试验材料 1.1.1 菌种 黄孢原毛平革菌购于中国科学院微生物研究所。 1.1.2 培养基 固体PDA培养基: 土豆浸出液2

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