小鼠骨髓细胞染色体制备与观察课件.pptxVIP

完整版课件 1 完整版课件 2 Ø 秋水仙素，可以抑制细胞分裂时的纺锤体形成，使处于 增殖状态的细胞停止在中期。注射到动物活体内，可以 收集到较多的中期分裂相的骨髓细胞。 完整版课件 3 完整版课件 4 n 实验目的与要求： 1.熟悉小鼠骨髓细胞染色体制备方法。 2. 了解小鼠染色体核型。 3.认识秋水仙素对细胞增殖的作用。 n 器材与试剂 n 内容与方法 ( 一) 小鼠骨髓细胞染色体制备 预处理 取材，收集细胞 低渗 染色 滴片 固定、再固定 完整版课件 5 v取材前2~3h，向腹 腔内注射秋水仙素。注 射浓度随动物种类不同 而异。 秋水仙素的主要 作用是使分裂细胞阻断 在有丝分裂中期，增加 中期分裂相的比例。 腹腔内注射秋水仙素2~3小时后，颈椎脱臼 处死小鼠。 完整版课件 6 小白 整版骨课件骼标本 7 完整版课件 8 取出小鼠的后肢股骨，注意不要将股骨剪断， 否则容易造成骨髓细胞的流失。 完整版课件 9 用纱布擦股骨上的肌肉组织，清除干净 注射器抽取生理盐水冲洗骨髓 完整版课件 10 Ø 反复冲洗骨髓腔获得骨 髓细胞， Ø 收集到离心管中, Ø 定容至6ml. 完整版课件 收集细胞： Ø 暴露骨髓腔， 11 Ø滴2~3滴于玻片上，吹气， Ø在酒精灯火焰过火8次， Ø做记号，凉干，染色 滴片后，将片子侵入Giemsa染液缸中，10~15分 钟，弃去染液，水洗，晾干，镜检。 完整版课件 12 滴片： 完整版课件 13 完整版课件 14 n 2、本实验中秋水仙素、低渗液、固定液各 起什么作用？ n 3、简述实验中应注意那些关键问题？ 完整版课件 15 (二) 染色体标本片观察 1.标本片质量评价 (1) 细胞密度合适、均匀； (2) 背景干净，细胞核和染色体清晰； (3) 有较多的分裂相； (4) 染色体分散较好。 完整版课件 16 细胞密度 完整版课件 17 染色体 分散度 完整版课件 18 2.染色体形态特征观察 完整版课件 19 16 9 15 8 22 10 3.染色体计数 22+8+10=40 9+16+15=40 完整版课件 20 ( 100×10) 21 一、中心体 二、高尔基体 完整版课件 22 一、中心体 (4×10) n 马蛔虫 整 课 切片全貌 23 中心体 (10×10) 完整版课件 24 中心体 (40×10) 完整版课件 25 二、高尔基体 (4×10) n脊神经完整 课切件片 26 高尔基体 (10×10) 完整版课件 27 高尔基体 (40×10) 完整版课件