动物细胞工程课件.pptVIP

细胞工程理论复1 高考考1.植物的组织培养（B） 2.动物的细胞培养与体细胞克隆（A） 3.细胞融合与单克隆抗体（A） 2 细胞工程 植物组织与 细胞培养 植物体细胞 杂交 动物细胞与 组织培养 细胞融合与 单克隆抗体 核移植与 体细胞克隆 ④ ③ 动物细胞工程 ⑤ 微生物 细胞工程 与其他生物 工程的联系 ① 植物细胞工程 ② 3 第一节 细胞工程概述 1 、细胞工程的发展历史(时间、人物、做法、意义) 开创动物细胞培养的先河 首次成功进行的植物细胞与组织培养 获得第一个植物体细胞杂交植株 克隆羊”多利”的诞生 2、细胞工程的概念(对象、条件、主要利用技术、目 的、应用) 3 、细胞工程的分类(分类依据、主要基本技术 及其操作要点) 4、细胞工程的应用(主要总体目的、具体应用操作 对象、意义) 5、细胞工程与其他生物工程4 第二节 细胞工程概述 1、 细胞全能性（含义、原理、全能性表达的条件、生 物体内细胞不能表达全能性的原因、全能性大小差异的 比较） 2、 植物组织培养（原理、条件、材料选择、一般过程、 主要应用注意：①概念理解：外植体、愈伤组织、脱分化、再分化、 胚状体 ②植物组织培养的培养基成分和要求（注意联系选修一） ③人工种子的结构及优点 5 ３、植物细胞培养（概念、原理、一般过程、生物反应器 大规模培养植物细胞的过程、目的、分类、优点、应用） 注意：①概念理解：悬浮培养、继代培养 ②植物细胞培养的培养基成分和要求（注意与植物组织培养 的培养基比较） 4、 植物原生质体培养（原生质体的概念、来源、制备的 基本过程、特点、主要应用） ５、 植物体细胞杂交（概念、特点、基本过程、存在问 题及原因） 6 第三节 动物细胞工程 １、 动物细胞工程（内容、基础） ２、 动物细胞和组织培养（原理、材料选择及原因、一 般过程、培养条件、主要应用） 注意：①概念理解：原代培养、传代培养、细胞株＜特点应用＞ 、 细胞系 ②胰蛋白酶处理的原因、目的和注意事项 ③动物细胞培养和植物细胞和组织培养的区①、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） ②、营养　（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） ③、温度和PH　　　　36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 ④、气体环境：O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） ２、 细胞核移植和动物体细胞克隆 ①概念及体细胞克隆的关键技术 ②克隆羊的产生过程和分析（原理、材料＜卵细胞的细胞 质＞选择的原因、应用的生物技术、性状的遗传特点） ③克隆人和人体器官的技术路线分析 ④克隆动物的研究意克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 改良动物品种 治疗人类疾病，作为供体 保护濒危动物 8 ３、 细胞融合和单克隆抗体 ①细胞融合技术的概念、应用、促进细胞融合的方法、 最重要的用途 ②单克隆抗体的概念、特点、制备的一般过程、主要 应用 注意分析：⑴单克隆抗体的制备本过程利用了哪些 原理？ ⑵为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ ⑶如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？ 9 思考：1、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物 质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限 增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体. 3.如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？ 融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤 细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用 “有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培 养，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。然后检测各孔上 清液中细胞分泌的抗体（常用酶联免疫吸附试验法），那些上清液 可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证 是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进 行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 6 47 48 49 50 51 52 7 53 54 返回 55 56 1. 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 3 76 77 78 79 80 5 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 返回