DB44T 1012-2012底泥中甲基睾丸酮的测定.docx

ICS 13.060 Z 16 备案号：34645-2012 DB44 广 东 省 地 方 标 准 DB44/T 1012—2012 底泥中甲基睾丸酮的测定 Determination of methyltestosterone residues in sediment 2012-06-04发布 2012-09-15实施 广 东 省 质 量 技 术 监 督 局 发布 DB44/T 1012—2012 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 的规定进行起草。 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由广东省海洋与渔业局提出。 本标准由广东省水产标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：中国水产科学研究院南海水产研究所、中山市渔农养殖科技开发加工园。 本标准主要起草人：邓建朝、杨贤庆、李来好、岑剑伟、吴燕燕、魏涯、陈曼华。 1 DB44/T 1012—2012 底泥中甲基睾丸酮的测定 1 范围 本标准规定底泥中甲基睾丸酮残留量的检测方法。 本标准适用于底泥中甲基睾丸酮残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 17378.5 海洋监测规范第五部分沉积物分析 3 原理 以甲醇提取底泥中的甲基睾丸酮，经离心除去固体物及部分杂质后，取上清液蒸发至近干，用流 动相溶解，经滤膜过滤后，反相色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法定量。 4 试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，试验用水应符合 GB/T 6682 一级水的标准。 4.1 甲醇。 4.2甲醇：色谱纯。 4.30.5%乙酸溶液：取0.5 mL冰乙酸于100 mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。 4.4甲基睾丸酮标准储备液(200 Mg/mL): 准确称取甲基睾丸酮标准品(含量≥98%)10.0 mg, 用甲 醇(4.2)溶解，定容于50 mL容量瓶中， -18℃避光保存。 4.5甲基睾丸酮标准工作液：准确吸取适量甲基睾丸酮标准储备液 (4.4),用甲醇(4.2)逐级稀释成 浓度为0.05 μg/mL～50 Hg/mL的标准工作液。 5 仪器 5.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器。 5.2电子分析天平：感量0.0001 g。 5.3 天平：感量0.01 g。 5.4 离心机：5000 r/min。 5.5 萃取振荡仪。 5.6 旋转蒸发器。 6 色谱条件 2 DB44/T 1012—2012 6.1 色谱柱： Cis柱，250 mm×4.6 mm(i.d.), 粒度5 Hm; 或与之相当的色谱柱。 6.2 流动相组成：甲醇(4.2)+0.5%乙酸溶液(4.3)=77+23 (V?+V?)。 6.3 流速：1.0 mL/min。 6.4柱温：30℃。 6.5 进样量：20 。 6.6 检测器：检测波长254 nm。 7 操作方法 7.1 样品制备 将试样用玻璃棒搅拌混合均匀，12 h 内测定；如不能立即测定，应放置于0℃~4℃冰箱中，48 h 内测定。 7.2 提取和净化 称取10.0g 试样于100mL聚丙烯离心管中，加入20mL甲醇，加塞剧烈震荡提取10min, 以4000r/min 离心10min, 将上清液转移至梨形瓶中，残渣加入20mL甲醇，重复上述操作，合并提取液于梨形瓶中。 在45℃水浴条件下减压蒸发至近干，残留物用1.0mL流动相溶解，取溶解液过0.45 μm微孔滤膜，供液 相色谱测定。 另取10.0 g 试样，按照 GB 17378.5 进行含水率测定。 7.3 色谱分析 将标准工作液和样品提取液置于液相色谱仪进样器中，按上述色谱条件进行色谱分析，记录峰面 积，响应值均应在仪器检测的线性范围之内，根据标准品的保留时间定性，外标法定量。标准色谱图 参见附录A中图A.1 8 计算 试样中甲基睾丸酮的残留量按照公式(1)计算，计算结果需扣除空白值，结果保留三位有效数字。 ( 1) 式中： X—试样中甲基睾丸酮含量，单位为微克每千克 (Hg/kg); cs—标准溶液中甲基睾丸酮含量，单位为微克每毫升(μg/mL); A—试液峰面积响应值； V- 试液定容体积，单位为毫升 (mL); A一标准溶液峰面积响应值； m- 试样质量，单位为克 (g)。 9 线性范围 甲基睾丸酮标准溶液的线性范围：0.05 μg/mL～50 μg/mL。 3 DB44/T 1012—2012 1