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本文档主要介绍了一种分解纤维素的微生物——纤维素分解菌,通过使用某种方法进行筛选。##选择培养1.**步骤**:-**取二支20mL的试管**-**各加入一张滤纸条**-**各加入pH4.8,物质量为0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液11ml和10ml甲乙**-在乙试管中加入1mL纤维素酶-**两支试管固定在锥形瓶中,放在140r/min的摇床上振荡1h**-结果:乙试管的滤纸条消失2.**适用范围
方法一 缺点是操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。 方法二 缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质,可以使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应;缺点二有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红,形成明显的透明圈与,纤维素分解菌不易区分。优点是操作简便,不存在菌落混杂问题。 本文档共46页;当前第31页;编辑于星期三\2点10分 比较项目 分解尿素的细菌 纤维素分解菌 选 择 培养 基 原理 培养基类型 目的 将细菌涂布在只有 尿素做氮源的选择 培养基上 将细菌涂布在只有 纤维素粉做碳源的 选择培养基上 固体培养基 液体培养基 筛选菌株 选择培养 本文档共46页;当前第32页;编辑于星期三\2点10分 选择培养的操作方法 将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下震荡培养1~2天,直至培养液变浑浊。也可重复选择培养。 思考:据“摇床”、“震荡”分析纤维素分解菌的异化作用类型? 四、操作提示 本文档共46页;当前第33页;编辑于星期三\2点10分 课题3 分解纤维素的微生物的分离 本文档共46页;当前第1页;编辑于星期三\2点10分 一、课题背景 阅读课本27页基础知识部分第一、二段,回答下列问题: 1. 纤维素在生物圈的分布状况? 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。 (一)纤维素与纤维素酶 本文档共46页;当前第2页;编辑于星期三\2点10分 纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用,这是因为它们能够产生纤维素酶。 草食性动物是怎样消化食物中纤维素的? 胃中生活着大量分解纤维素的微生物,能产生纤维素酶,将纤维素分解成葡萄糖。 本文档共46页;当前第3页;编辑于星期三\2点10分 纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、 CX酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 纤维素 纤维二糖 葡萄糖 C1酶 Cx酶 葡萄糖苷酶 2.纤维素酶的组成及作用? 本文档共46页;当前第4页;编辑于星期三\2点10分 3、纤维素的分解 能分解纤维素的微生物有各种细菌、真菌和少数放线菌。 方法:滤纸崩溃法 4、纤维素酶活性的测定实验: 本文档共46页;当前第5页;编辑于星期三\2点10分 滤纸崩溃法 体会纤维素酶作用的实验: 本文档共46页;当前第6页;编辑于星期三\2点10分 ①取二支20mL的试管 实验:纤维素酶分解纤维素的实验 ②各加入一张滤纸条 ③各加入pH4.8,物质量为0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液11ml和10ml 甲 乙 ④在乙试管中加入1mL纤维素酶 ⑤两支试管固定在锥形瓶中,放在 140r/min的摇床上振荡1h ⑥结果:乙试管的滤纸条消失 讨论:乙试管的滤纸条为什么会消失?甲试管的作用是什么? 本文档共46页;当前第7页;编辑于星期三\2点10分 纤维素酶是一种 ,一般认为它至少包括三种组分,即 、 CX酶和 ,前两种酶使纤维素分解成 ,第三种酶将纤维二糖分解成 。 复合酶 C1酶 葡萄糖苷酶 是自然界中纤维素含量最高的天然产物,纤维素的分解需要在 的催化作用下完成。 棉花 纤维素酶 基础知识填空: 纤维二糖 葡萄糖 本文档共46页;当前第8页;编辑于星期三\2点10分 下列生物能分解纤维素的是( ) ①人 ②兔 ③牛 ④蘑菇 ⑤纤维杆菌 A.①②③④⑤ B.②③⑤ C.②③④⑤ D.③⑤ C 本文档共46页;当前第9页;编辑于星期三\2点10分 (二)纤维素分解菌的筛选 1、筛选纤维素分解菌的方法是______________。该方法可以通过________反应直接筛选。 刚果红染色法 颜色 阅读课本课本28页相关部分,回答下列问题: 本文档共46页;当前第10页;编辑于星期三\2点10分 2、其原理是:刚果红可以与纤维素形成____________,当纤维素被_________分解后,红色复合物无法形成,出现以_____________为中心的________,我们可以通过____________来筛选纤维素分解菌。 红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 是否产生透明圈 刚果红染色法:这种方法能够通过颜色反应直接对微生
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