DB44T 1011-2012水体中甲基睾丸酮的测定.docx

ICS 13.060 Z 16 备案号：34644-2012 DB44 广 东 省 地 方 标 准 DB44/T 1011—2012 水体中甲基睾丸酮的测定 Determination of methyltestosterone residues in water 2012-06-04发布 2012-09-15实施 广 东 省 质 量 技 术 监 督 局 发布 DB44/T 1011—2012 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 的规定进行起草。 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由广东省海洋与渔业局提出。 本标准由广东省水产标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：中国水产科学研究院南海水产研究所、中山市渔农养殖科技开发加工园。 本标准主要起草人：杨贤庆、邓建朝、岑剑伟、吴燕燕、魏涯、黄卉、陈曼华。 1 DB44/T 1011—2012 水体中甲基睾丸酮的测定 1 范围 本标准规定水体中甲基睾丸酮残留量的高效液相色谱检测方法。 本标准适用于水体中甲基睾丸酮残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规 格和试验方法 3 原理 以二氯甲烷提取水体中残留的甲基睾丸酮，提取液蒸发至近干后，用流动相溶解定容，经微孔滤 膜过滤，用反相色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法定量。 4 试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯， 试验用水应符合 GB/T 6682 一级水的标准。 4.1 甲醇：色谱纯。 4.2 二氯甲烷。 4.30.5%乙酸溶液：取0.5 mL 冰乙酸于100 mL 容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。 4.4 甲基睾丸酮标准储备液(200 Mg/mL): 准确称取甲基睾丸酮标准品(含量≥98%)10.0 mg, 用甲 醇(4. 1)溶解，定容于50 mL 容量瓶中， -18℃避光保存。 4.5 甲基睾丸酮标准工作液：准确吸取适量甲基睾丸酮标准储备液 (4 .4),用甲醇(4 . 1)逐级稀释 成浓度为0.05 Hg/mL～50 μg/mL 的标准工作液。 5 仪器 5.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器。 5.2 电子分析天平：感量0.0001 g。 5.3 萃取振荡仪。 5.4 旋转蒸发器。 6 色谱条件 6.1 色谱柱： Ci 柱，250 mm×4.6 mm(i.d.), 粒度5 μm; 或与之相当的色谱柱。 6.2 流动相组成：甲醇(4.1)+0.5%乙酸溶液(4.3)=77+23 (V?+V?)。 6.3 流速：1.0 mL/min。 2 DB44/T 1011—2012 6.4 柱温：30℃。 6.5 进样量：20 风。 6.5 检测器：检测波长254 nm。 7 操作方法 7.1 样品制备 将水样混合均匀，12 h内测定；如不能立即测定，应放置于0℃~4℃冰箱中，48 h内测定。 7.2 提取和净化 先将水样用0.45 Hm膜过滤，除去固体杂质。准确移取100 mL水样于250 mL分液漏斗，加入30 mL 二氯甲烷，震摇5 min, 静置分层，将二氯甲烷层移至100 mL的梨形瓶。向分液漏斗加入30 mL二氯甲 烷重复上述步骤一次，静置分层后，将二氯甲烷层并入同一梨形瓶，于45℃条件下减压蒸发至近干。 残留物用1.0 mL流动相溶解，取溶解液过0.45 Mm微孔滤膜，供液相色谱测定。 7.3 色谱分析 将标准工作液和样品提取液置于液相色谱仪进样器中，按上述色谱条件进行色谱分析，记录峰面 积，响应值均应在仪器检测的线性范围之内，根据标准品的保留时间定性，外标法定量。标准色谱图 参见附录A中图A.1。 8 计算 试样中甲基睾丸酮的残留量按照公式(1)计算，计算结果需扣除空白值，结果保留三位有效数字。 ( 1) 式中： X——试样中甲基睾丸酮含量，单位为微克每升 (Hg/L); Cs——标准溶液中甲基睾丸酮含量，单位为微克每毫升(μg/mL); A——试液峰面积响应值； A——标准溶液峰面积响应值； V— 试液定容体积，单位为毫升 (mL); ——试样体积，单位为毫升 (mL)。 9 线性范围 甲基睾丸酮标准溶液的线性范围：0.05 Hg/mL～50 μg/mL。 10 检测限、精密度和回收率 10.1 检测限 本方法的检测限：0.5 Mg/L。 3 DB44/T 1011—2012 10.2 精密度 本方法的相对标准偏差≤10%。 10.3