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西南林业大学本科毕业论文（设计）开题报告 论文题目 云南榧树内生放线菌抑菌活性研究 专 业 名 称 生物技术 年 级 2010 级 学 生 学 号 20100451001 学 生 姓 名 黄伟 指导教师（职称） 李靖（副教授） 填 表 时 间 教务处制 指导 教师 基本 情况 指导教师姓名 性 别 年 龄 学历或 学位 专业技术 职务或职称 工作单位 李靖 女 38 博士 副教授 西南林业大学 课题 来源 1、导师课题的一部分；2、其它(须具体说明)： 。 1、研究目的、意义 植物内生菌(endophyte)是指生活与健康植物组织内部、不引发植物产生明显病症的微生物， 但在植物衰老或外界条件刺激下，植物自身免疫力下降，也可能出现某些病症；植物内生菌包括真 菌、细菌与放线菌等，它们在其全部或部分生活周期内生活在植物组织内。目前，对植物内生菌的 定义还有不少争论，但以Hallmann依据植物与内生菌的相互关系所做的定义最为全面，他认为植物 内生菌应满足两个条件：(1)可从表面消毒的植物组织或植物组织内部分离到；(2)不对植物造成 可见的伤害［1］。 放线菌是土壤中重要的一类原核生物，通常指在生活史中具有分支菌丝形态的细菌。但随着16S rRNA序列分析技术用于放线菌的系统进化研究，放线菌的定义逐渐演变为：一群革兰式氏阳性、高 G+C含量(55%)的细菌，除了包括通常所指的放线菌外，其他如微球菌属、节杆菌属、丙酸杆菌 属、肾杆菌属(Renibacterium)、口腔球菌数(Stomatococcus)、热酸菌属(Acidothemus)等也划 入放线菌类群。这些细菌也是植物根际微生物中的重要组成部分，有些是植物病原菌，如棒状杆菌 属的某些种以及引起马铃薯疮疥病的疮疥链霉菌⑵。 近年来，随着植物内生菌的发现，以及其新颖的代谢产物和越来越多的应用实例，从植物中分 离内生菌用来防治植物中的病虫害、防治人类和动物中的疾病，已经成为了科技发展的一种趋势， 而从具有药用价值的植物中分离内生菌更是现在研究的一大热点。从榧树这种具有抗癌作用的植物 中分离内生菌，不仅可能得到产生抗癌物质的内生菌，还能从中得到具有农用价值的内生菌L本 实验通过研究从云南榧树中分离得到的内生放线菌，并通过分离的内生放线菌对6种常见的农业病 菌进行抑菌试验，探索由云南榧树分离得到的内生放线菌在农业常见病害上的有效功效，为农业防 治几种常见病害提供一定的理论和实践基础。 2、国内外研究现状及发展趋势 许多研究表明植物内生菌能产生与宿主植物代谢物相似或相同的次生代谢产物，或者结构和活 性更为新颖的化合物，例如：如1993年，美国蒙大拿州立大学Strobel从短叶紫杉(Taxus breviforg 分离到一株内生真菌，它能产生与宿主植物产生同一产物的肿瘤治疗剂一一紫杉醇囹；StrobelW究 小组于2000年在澳大利亚北部土著居民常用来治疗外伤的一种药用植物 一一蛇藤(Kennedia nigriscans)中分离了一株新的内生链霉菌，这株菌能产生新颖的多肽类抗生素munumbicins A B、 C和D［5］。因此从药用植物中分离内生菌作为新的资源开发有重要的意义。 到目前为止，对植物内生放线菌与植物的关系研究并不多，特别是链霉菌与植物的关系研究更 是十分缺乏，主要由于链霉菌中大多对植物无致病性或所导致病害并不严重而被忽略。用荧光假单 胞菌DR54包被的大麦种子长出的幼苗在发芽后的21d内，荧光假单胞菌DR54可占假单胞菌种群的75% 左右，但到50d，其比例则低于10%，而放线菌的数量则不受荧光假单胞菌DR54与抗真菌药物i mazalil 的影响，其数量随时间不断增加并且很可能定殖在大麦的根部皮层。在弗兰克氏菌中，大多数菌种 可以耐受Pb2+(6-8mmol/L)、CrO42- (1.0-1.75mmol/L)、AsO43-(50mmol/L)与SeO22-(1.5-3.5mmol/L)， 但对Ag+、AsO2-、Cd2+、SbO2-与Ni2+敏感，不同菌株对Cu2+耐受程度也不同，并且各种菌株对重金 属离子的解毒机制也不相同，弗兰克氏菌的这种特性可能有利于增强宿主植物对重金属离子抗性。 近年来在豆科植物中也发现有些内生放线菌定殖于根瘤的表层细胞，这种定殖可增加根瘤的体积， 增加根瘤的数目并增加根瘤内类菌体的活力，推测很可能与放线菌向根瘤提供铁有关6]。 目前，大约有超过2/3的微生物来源的生物活性物质来自于放线菌的次生代谢产物，例如对多 种蔬菜病害有较强抑制作用的中生菌素、对许多作物的真菌病害有良好防治效果的长川霉素等7-8]。 现目前应用较为广泛的由烟田土壤中分离得到的内生放线菌Y23，可对禾谷镰刀菌、苹果轮纹病菌 及大麦条纹病菌产生较好的抑制作用，而且对青枯病原