不同醇洗工艺制备大豆浓缩蛋白的研究.docx

不同醇洗工艺制备大豆浓缩蛋白的研究 采用春收法生产大豆浓缩型，品质优良，无废水，是豆蛋白生产的发展方向。但作为醇洗浓缩蛋白原料的低温豆粕的生产工艺复杂,生产成本较高。若能以高温豆粕为原料采用醇洗工艺生产饲用大豆浓缩蛋白,将会大大节省生产成本,极大地促进大豆浓缩蛋白作为优质饲料的推广应用。为了了解高温豆粕醇洗浓缩蛋白生产的可行性,分别以高温豆粕和低温豆粕为原料采用醇洗浓缩蛋白工艺提取浓缩蛋白,并分别对其组分进行了对比研究。 1 材料和方法 1.1 试验用化学试剂 原料:取自于国内大豆油脂加工企业的高温豆粕和低温豆粕。 化学试剂:K2SO4,Cu SO4,H2SO4,H3BO3,Na OH,酒石酸甲钠,盐酸标准溶液,65%乙醇溶液,90%乙醇溶液,高锰酸钾等。 1.2 u3000酸、电、汽、u 凯氏定氮仪,RE52-86A旋转蒸发器,SHZ-88水浴恒温振荡器,AL104电子天平,LD4-2型低速离心机,电热鼓风干燥箱,高温电炉,循环水式真空泵,722型分光光度计。 1.3 测试方法 1.3.1 原材料的制备 1.3.2 乙醇的子处理固液分离 采用稀、浓乙醇两次醇洗工艺,分别对高温豆粕和低温豆粕进行醇洗生产浓缩蛋白。第一次,取100 g粕粉于2 000 m L烧杯中,加入500 m L浓度为75%的乙醇(固液比1∶5),用保鲜膜封口防止乙醇挥发,然后放入恒温振荡器进行浸洗,浸出时间60 min,浸出温度30℃,之后利用真空抽滤进行固液分离。第二次,对第一次浸出后的粕用浓度为90%的乙醇进行浸出(固液比1∶5),浸出时间30 min,浸出温度50℃,利用真空抽滤进行固液分离。分离出的粕经自然风干脱溶得浓缩蛋白。两次的乙醇萃取液经旋转蒸发器蒸发浓缩得到糖蜜,蒸发出的乙醇回收。 1.3.3 测量 1.3.3. 总糖和总糖 粗蛋白GB 5511-1985,水溶性蛋白GB 5511-1985,粗脂肪GB 5512-1985,总糖GB/T 5009.7-2003,灰分GB 5505-1985,水分GB 5497-1985。 1.3.3. 标准曲线的制备 标准溶液的配制:精密称取5.0 mg染料木甙于50 m L容量瓶中,以95%乙醇溶解,并定容至刻度,摇匀。标准曲线的制备:精密吸取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 m L标准溶液,分别置于10 m L容量瓶中,并分别加入95%乙醇,定容至刻度,摇匀,以95%乙醇作空白对照,在255 nm处用紫外分光光度计测吸光度,以测得的吸光度对纯品量作图,得标准曲线,见图1。 称取0.02~0.03 g样品于50 m L容量瓶中,用95%乙醇溶解并定容至刻度,再用移液管移取1 m L置于10 m L容量瓶中,用95%乙醇定容至刻度,摇匀,然后用分光光度计在255 nm处测吸光度,根据标准曲线计算所称取样品中异黄酮的含量。 1.3.3. 标准曲线的绘制 标准溶液的配制:精密称取齐墩果酸标准品15.0 mg于50 m L容量瓶中,以95%乙醇溶解,并定容至刻度,摇匀。标准曲线的制备:精密吸取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 m L标准溶液,分别置于10 m L具塞试管中,在90℃水浴上蒸干,然后在试管中加入新配制的5%的香草醛-冰醋酸溶液0.2 m L,高氯酸0.8 m L,置于60℃水浴上加热15 min,然后用流水冷却,加冰醋酸5 m L,摇匀,用分光光度计在550 nm波长测定吸光度,以测得的吸光度与纯品量作图,得标准曲线,见图2。 称取0.02~0.03 g样品于50 m L容量瓶中,用95%乙醇溶解并定容至刻度,再用移液管移取1 m L于具塞试管中,在90℃水浴上蒸干,然后在试管中加入新配制的5%的香草醛-冰醋酸溶液0.2 m L,高氯酸0.8 m L,置于60℃水浴上加热15 min,然后用流水冷却,加冰醋酸5 m L,摇匀,用分光光度计在550 nm处测吸光度,根据标准曲线计算所称样品中皂甙的含量。 2 结果与讨论 2.1 高温和低温豆的主要成分 高温豆粕和低温豆粕主要组分的测定结果见表1。 2.2 高温豆腐醇和低温豆腐醇的主要成分含量 高温豆粕和低温豆粕制得醇洗浓缩蛋白主要组分的测定结果见表2。 2.2.1 用甲醇清洗浓缩的蛋白质含量 2.2.2 不同长度的罪犯,其符合以下指标 由表2可知,高温豆粕醇洗浓缩蛋白的NSI为4.74%,低于低温豆粕醇洗浓缩蛋白的NSI(8.54%)。再对比表1和表2可知,无论高温豆粕还是低温豆粕,其醇洗浓缩蛋白的NSI均低于其对应原料豆粕的NSI。分析其主要原因在于:乙醇对豆粕的醇洗过程使蛋白质变性,从而使其醇洗浓缩蛋白的NSI较豆粕的降低;高温豆粕的NSI本身就较低温豆粕低,其对应醇洗浓缩蛋白的NSI也低。 2.2.3 低温豆浆口感及对比 高