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循环、呼吸、泌尿综合实验
通过观察动物在整体情况下,各种理化刺激引起循环、呼吸、泌尿等功能的适应性改变,加深对机体在整体状态下的整合机制的认识。
材料与方法
材料:
健康成年家兔、20%氨基甲酸乙酯、0.5%肝素生理盐水、1:10000去甲肾上腺素、呋塞米(速尿)、神经垂体素、20%葡萄糖溶液、生理盐水、3%乳酸、CO2气体、手术器械一套、兔手术台、动脉夹、注射器(1mL、5 mL、50 mL)计算机生物信号采集处理系统(刺激器、计滴器)、刺激电极、压力换能器、气管插管、橡皮管,球囊、动脉插管,膀胱套管、刻度试管、金属钩、铁支架、丝线 。
方法:
2.1实验的准备(1)麻醉固定:动物称重后,自耳缘静脉缓慢注入20%氨基酸乙酯溶液
(5mL.kg-1),麻醉后仰卧固定于兔手术台。(2)颈部手术:① 行常规气管插管术;② 行右侧颈总动脉插管术,并连接压力换
能器,记录血压。(3)上腹部手术:上腹部剪毛,切开胸骨剑突部位的皮肤,沿腹白线切开长约2cm
的切口,小心分离暴露剑突软骨及骨柄,用金冠剪剪断剑骨柄,将缚有长线的金属钩钩于剑突中间部位,线的另一端连张力换能器,记录呼吸(见呼吸实验)。
(4)下腹部手术:下腹部剪毛,沿耻骨上缘正中线切开皮肤约4cm,剪开腹壁(不要伤及腹腔内器官),在腹腔底部找出两侧输尿管,作膀胱插管,暴露膀胱行膀胱漏斗结扎术。
2.2连接实验装置 分别将压力换能器、张力换能器和记滴器与计算机生物信号采集处理系统相连,
选定各信号输入的通道,调整好波宽、增益、刺激强度、时间常数等实验参数,调整动脉血压波形、呼吸波形和尿滴,以便获得更良好的观察效果。
2.3实验项目 (1)记录一段正常的动脉血压曲线、呼吸曲线和尿量。 (2)吸入CO2气体:将装有CO2气囊(可用呼出气体)的管口对准气管插管,观察
血压、呼吸及尿量的变化。
(3)增大无效腔:在气管插管的一侧管接上一长50cm的胶管观察血压、呼吸及尿量的变化。
(4)改变血液的酸碱度 由耳缘静脉较快的注入3%乳酸2mL,观察H+增多时对血压、呼吸及尿量的影
响。 (5)夹闭颈总动脉:待血压稳定后,用动脉夹夹住左侧颈总动脉,观察血压、呼吸及尿
量的变化。出现明显变化后去除夹闭。 (6)电刺激迷走神经和减压神经:将保护电极与刺激输出线(通道)连接,待血压恢复
后,分别将右侧迷走神经、减压神经轻轻搭在保护电极上,选择刺激强度6V,刺激频率40~50次.S-1,刺激15~20s,观察血压、呼吸及尿量的变化。
(7)切断迷走神经:剪断左侧迷走神经,记录并观察呼吸运动的变化。然后剪断右侧迷走神经,记录并观察呼吸运动的变化。
(8)以2V、25Hz,持续10s,波宽2ms的串刺激刺激右侧迷走神经中枢端,记录并观察呼吸运动的变化。
(9)静脉注射呋塞米(速尿):待血压恢复后,以5ml/kg体重剂量由耳缘静脉注射呋塞米,观察血压、呼吸及尿量的变化。
(10)静脉注射去甲肾上腺素(NE):待尿量恢复后,由耳缘静脉注射0.1g/l去甲肾上腺素0.3ml,观察血压、呼吸及尿量的变化。
(11)静脉注射葡萄糖:待尿量恢复后,由耳缘静脉注射20%葡萄糖5mL,观察血压、呼吸及尿量的变化。
(12)静脉注射垂体后叶素:待尿量恢复后,由耳缘静脉缓慢注射垂体后叶素2U,观察血压、呼吸及尿量的变化。
三、结果
平均动脉压(mmHg)
呼吸流量(ml/s)
尿量
对照
105.09±3.38
9.44±0.9
正常
增大无效腔
105.53±3.18
31.5±6.5
增加
吸入CO2
102.87±1.31
96.9±10
增加
乳酸
120.36±5.70
53.1±6.6
增加
夹闭右颈总动脉
132.89±2.56
9.6±0.9
增加
葡萄糖
105.34±6.23
9.6±1
增加
刺激减压神经
64.47±1.23
9.4±0.8
减少
刺激迷走神经
78.61±6.17
1±0.2
减少
NE
137.52±14.71
9.4±0.9
减少
Ach
—
—
减少
呋塞米
98.74±6.39
9.9±1.1
增加
垂体后叶素
107.32±5.39
9.4±1.1
减少
四、讨论与分析
1. 增加浓度:
表现——家兔呼吸幅度增加,尿量增加,血压无明显变化。
原理——动脉血中CO2分压升高,CO2的浓度也增高,可使呼吸加深加快,肺通气量增加。其机制是:①通过延髓中枢化学感受区兴奋,使呼吸中枢兴奋——由于血液CO2能迅速通过血--脑脊液屏障,由于脑脊液的缓冲能力差,故PH值下降,从而使中枢化学感受区周围液体中的氢离子浓度升高。刺激中枢化学感受区,引起呼吸中枢兴奋,呼吸增强。②通过外周化学感受器
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