微生物的实验室培养.ppt

课题1 微生物的实验室培养;背景知识;一、基础知识;1、什么是培养基？;液体培养基;（1）按物理状态来分：培养基可分为液体培养基和固体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。 （2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。 （3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。;5、培养基含有哪些基本成分？为什么？自养形微生物和异养型微生物的碳源分别是什么？;6、培养基在含有基本成分外，还需满足哪些条件？;（二）无菌技术;1、获得纯净培养物的关键是什么？; 3、无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？;5、消毒的方法有哪些？;6、灭菌的方法有哪些？;②干热灭菌：将灭菌物品（能耐高温的、需要保持干燥的物品）放入干热灭菌箱内，在160~170℃加热1~2小时可达到灭菌的目的。;③高压蒸汽灭菌：压力为100Pa，温度为121℃，时间15~30分钟。; 判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如需要请选择合适的方法。1、培养细菌用的培养基和培养皿。2、玻棒、试管、烧瓶和吸管。3、实验操作者的双手。;二、实验操作;1培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。; 4在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。;（二）纯化大肠杆菌; 1为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。; 2在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 以免接种环温度太高，杀死菌种。 3在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。; 稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。; 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围；等等。;三、结果分析与评价; 2、在接种大肠杆菌的培养基上，你是否观察到了独立的菌落？这些菌落的颜色、形状和大小相似吗？; 3、培养12小时和24小时后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，请分析产生差异的原因？;四、练习课题1 微生物的实验室培养;背景知识;一、基础知识;1、什么是培养基？;液体培养基;（1）按物理状态来分：培养基可分为液体培养基和固体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。 （2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。 （3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。;5、培养基含有哪些基本成分？为什么？自养形微生物和异养型微生物的碳源分别是什么？;6、培养基在含有基本成分外，还需满足哪些条件？;（二）无菌技术;1、获得纯净培养物的关键是什么？; 3、无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？;5、消毒的方法有哪些？;6、灭菌的方法有哪些？;②干热灭菌：将灭菌物品（能耐高温的、需要保持干燥的物品）放入干热灭菌箱内，在160~170℃加热1~2小时可达到灭菌的目的。;③高压蒸汽灭菌：压力为100Pa，温度为121℃，时间15~30分钟。; 判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如需要请选择合适的方法。1、培养细菌用的培养基和培养皿。2、玻棒、试管、烧瓶和吸管。3、实验操作者的双手。;二、实验操作;1培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。; 4在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 空气