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医学免疫学实验免疫标记技术;免疫标记技术;★免疫印迹技术(western blot);直接免疫荧光 荧光素直接标记抗体, 检测抗原。;显色:每孔加显色液A、B各1滴，混匀，封板，37 ?C ，15min Fluorochrome 间接法indirect ELISA 显色:每孔加显色液A、B各1滴，混匀，封板，37 ?C ，15min 定性、定量、定位。 间接ELISA法检测血清抗-HBsAb TMB/OPD + H2O2 间接法indirect ELISA 抗人IgM 或 IgG Fc段抗体 显色:每孔加显色液A、B各1滴，混匀，封板，37 ?C ，15min （工业化生产）已知抗原：乙肝表面抗原(HBsAg)， 荧光素直接标记抗体, 检测抗原。 一抗与标本中抗原结合，再用荧光素标记的二抗进展检测。 第5孔，待检血清2，加待检血清1滴 (不洗，因为二抗过量) 空白 阴性 阳性 待测1 待测2 Labeled Anti-Ig 免疫印迹〔Western blotting〕：“定性〞、“模拟定量〞； 概念：用荧光素、酶、同位素等标记抗体或抗原 四甲基联苯胺(TMB); 人工制备抗体的类型;单克隆抗体〔mAb) K?hler 和 Milstein 1975年建立的技术，通过杂交瘤技术获得的针对单一抗原决定簇的高特异性抗体。;*;免疫荧光技术;定位：;共定位：;免疫荧光可“定位〞 、“定性〞 ，借助图像软件可进展模拟“定量〞分析；;酶标记技术;酶联免疫吸附试验Enzyme-Linked Immunosorbent Assays (ELISA) 用以测定相应抗原或抗体的技术称为免疫标记技术。 Fluorochrome 四甲基联苯胺(TMB) 洗板:弃去孔内液体，注满洗涤液，静置5sec甩干，重复3次。 空白 阴性 阳性 待测1 待测2 一抗与标本中抗原结合，再用荧光素标记的二抗进展检测。 木瓜/胃蛋白酶 抗体Fc段（为抗原） 人蛋白：1，2，3 …… K?hler 和 Milstein 1975年建立的技术，通过杂交瘤技术获得的针对单一抗原决定簇的高特异性抗体。 显色:每孔加显色液A、B各1滴，混匀，封板，37 ?C ，15min TMB/OPD + H2O2 Labeled Anti-Ig ★免疫印迹技术(western blot) 第3孔，阳性对照，加阳性对照血清1滴 异硫氰酸荧光素(FITC)：黄绿色 酶联免疫吸附试验Enzyme-Linked Immunosorbent Assays (ELISA) 加酶结合物 (酶结合二抗);双抗体夹心法Sandwich ELISA;间接法indirect ELISA;医学免疫学实验免疫标记技术;免疫标记技术;★免疫印迹技术(western blot);直接免疫荧光 荧光素直接标记抗体, 检测抗原。;显色:每孔加显色液A、B各1滴，混匀，封板，37 ?C ，15min Fluorochrome 间接法indirect ELISA 显色:每孔加显色液A、B各1滴，混匀，封板，37 ?C ，15min 定性、定量、定位。 间接ELISA法检测血清抗-HBsAb TMB/OPD + H2O2 间接法indirect ELISA 抗人IgM 或 IgG Fc段抗体 显色:每孔加显色液A、B各1滴，混匀，封板，37 ?C ，15min （工业化生产）已知抗原：乙肝表面抗原(HBsAg)， 荧光素直接标记抗体, 检测抗原。 一抗与标本中抗原结合，再用荧光素标记的二抗进展检测。 第5孔，待检血清2，加待检血清1滴 (不洗，因为二抗过量) 空白 阴性 阳性 待测1 待测2 Labeled Anti-Ig 免疫印迹〔Western blotting〕：“定性〞、“模拟定量〞； 概念：用荧光素、酶、同位素等标记抗体或抗原 四甲基联苯胺(TMB); 人工制备抗体的类型;单克隆抗体〔mAb) K?hler 和 Milstein 1975年建立的技术，通过杂交瘤技术获得的针对单一抗原决定簇的高特异性抗体。;*;免疫荧光技术;定位：;共定位：;免疫荧光可“定位〞 、“定性〞 ，借助图像软件可进展模拟“定量〞分析；;酶标记技术;酶联免疫吸附试验Enzyme-Linked Immunosorbent Assays (ELISA) 用以测定相应抗原或抗体的技术称为免疫标记技术。 Fluorochrome 四甲基联苯胺(TMB) 洗板:弃去孔内液体，注满洗涤液，静置5sec甩干，重复3次。 空白 阴性 阳性 待测1 待测2 一抗与标本中抗原结合，再用荧光素标记的二抗进展检测