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微生物实验抽签考试题
1.显微镜的基本构造?
机械装置、光学系统两大部分组成。
2.显微镜观察标本时的基本步骤?
先安放好显微镜,距离桌面边缘 10cm 左右。接通电源,打开镜
座处的照明光源,把聚光器调到最高,将待观察的标本玻片放在载物
台上,用玻片夹夹住,移动推进器使观察对象在物镜正下方。将×10
倍的物镜下降,先调节粗调节器使标本在视野中初步聚焦,在调节细
调节器调至图像清晰。调节时先从侧面注视,小心调节物镜靠近标本,
然后用目镜观察,慢慢调节物镜离开标本,以免因操作失误而损坏镜
头及玻片。
3.显微观察时如何调节光强?正确使用光强在显微镜操作中的意
义何在?
主要调节镜座照明光源的亮度、聚光器的高度、反光镜,一般虹
彩光圈数值孔径确定后不应再调节,但也不一定。意义,使视野的光
线均匀 ,量度适宜 ,如果量度过低或过高都会导致视野不清晰。
4.如何使用显微镜的油镜?观察时有哪些注意事项 ?
先高倍镜下找到要观察的目标,转动转换器将高倍镜转离工作位
置,在待观察的样本 区域第一滴香柏油 ,将油镜转到工作位置,从侧
面观察调节粗调节器使油镜的镜头浸到香柏油中。将聚光器调到最高
的位置并开足光圈 ,若所用油镜的数值孔径值超过 1.0 ,还应在聚光器
和载玻片之间滴加香柏油。调节照明视野的适应亮度 ,微调细调节器
使物象清晰,移动推进器仔细观察标本,记录所观察到的现象。
注意事项:切不可将高倍镜转动经过加有镜油的区域;应先从侧
面观察将油镜的镜头浸泡在镜油中,再微调节细调节器观察样品标本,
以免因操作失误而损坏镜头 ;有时按照规范的操作仍找不到目标,可
能是镜头下降还未到位 ,或因油镜上升过快 ,以至眼睛捕捉不到一闪
而过的物象,此时应重新操作。
5.为什么 目镜测微尺必须用镜台测微尺校正,而且接物镜改变 ,
校正也要改变?
目镜测微尺是放在接目镜的隔板上,用以测量经显微镜放大后的
细胞物象,因此在用目镜测微尺测量微生物大小前必须用镜台测微尺
校正;由于不同目镜和不同的物镜组合放大倍数是不一样的,目镜测
微尺每小格在不同条件下所代表的实际长度也是不同的,因此每次换
用物镜或目镜时都应重新校正。
6.高压蒸汽灭菌锅工作的基本原理?
加热时高压蒸汽灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽,待水蒸气急
剧的将空气从锅内排出去后,关闭排气阀,继续加热,此时,锅内蒸
汽压上升,使水的沸点升高,得到高于 100℃的温度。导致菌体蛋白
质凝固变性而达到灭菌的目的。
湿热灭菌效力比干热高的原因 :湿热中细菌吸水,蛋白质凝固所
需的温度降低 ,更易凝固;湿热的穿透性比干热的强 ;湿热的蒸汽有
潜热存在,能够迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力。
7.用于活菌计数的方法是哪些 ?各有何优缺点?
平板菌落计数法:将待测菌液经适当稀释后涂布在平板上;经过
培养后在平板上形成肉眼可见的菌落。统计菌落数,根据稀释倍数和
取样量计算出样品中细胞密度。
缺点 :待测样品往往不易完全形成单菌落 ,因此一个菌落不一定
是由一个细胞生长繁殖
而成 ,可能来自两个或多个细胞,因此平板菌落计数法得到的结
果往往比样品实际细胞数低 ;操作繁琐 ,结果需要培养一段时间才能
获得;测定结果受多种因素的影响。
优点 :直接反应样品中活细菌的数量。
8.细菌菌落特征的描述包括哪些方面 ?
形状、大小、颜色、中间是否凹凸、边缘是否光滑、菌落周围是
否有菌环等。
9.牛肉膏蛋白胨培养基包含哪些基本组分 ?
牛肉膏 3g、蛋白胨 10g、琼脂 15—20g、NaCl 5g、水 1000ml
10.微生物的分离为什么进行梯度稀释 ?
11.为什么进行倒置培养?
防止培养基被污染影响接种细菌的生长;这样可以防止养分沉淀
在培养基底部,可以给细菌提供充分的细菌。
12.何为 cfu ,通过分离培养对土壤细菌数量进行确定,为何可以
用 cfu ?
Cfu :colony-forming unit 的缩写,菌落形成单位。由于待测样
品往往不易完全分散成单个细胞,平板上形成的每个菌落不一定是由
一个细胞生长繁殖而成的,有的可能来自两个或两个以上的细胞,因
此,平板菌落计数的结果往往比样
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