微生物实验抽签考试题 .pdf

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微生物实验抽签考试题 1.显微镜的基本构造? 机械装置、光学系统两大部分组成。 2.显微镜观察标本时的基本步骤? 先安放好显微镜,距离桌面边缘 10cm 左右。接通电源,打开镜 座处的照明光源,把聚光器调到最高,将待观察的标本玻片放在载物 台上,用玻片夹夹住,移动推进器使观察对象在物镜正下方。将×10 倍的物镜下降,先调节粗调节器使标本在视野中初步聚焦,在调节细 调节器调至图像清晰。调节时先从侧面注视,小心调节物镜靠近标本, 然后用目镜观察,慢慢调节物镜离开标本,以免因操作失误而损坏镜 头及玻片。 3.显微观察时如何调节光强?正确使用光强在显微镜操作中的意 义何在? 主要调节镜座照明光源的亮度、聚光器的高度、反光镜,一般虹 彩光圈数值孔径确定后不应再调节,但也不一定。意义,使视野的光 线均匀 ,量度适宜 ,如果量度过低或过高都会导致视野不清晰。 4.如何使用显微镜的油镜?观察时有哪些注意事项 ? 先高倍镜下找到要观察的目标,转动转换器将高倍镜转离工作位 置,在待观察的样本 区域第一滴香柏油 ,将油镜转到工作位置,从侧 面观察调节粗调节器使油镜的镜头浸到香柏油中。将聚光器调到最高 的位置并开足光圈 ,若所用油镜的数值孔径值超过 1.0 ,还应在聚光器 和载玻片之间滴加香柏油。调节照明视野的适应亮度 ,微调细调节器 使物象清晰,移动推进器仔细观察标本,记录所观察到的现象。 注意事项:切不可将高倍镜转动经过加有镜油的区域;应先从侧 面观察将油镜的镜头浸泡在镜油中,再微调节细调节器观察样品标本, 以免因操作失误而损坏镜头 ;有时按照规范的操作仍找不到目标,可 能是镜头下降还未到位 ,或因油镜上升过快 ,以至眼睛捕捉不到一闪 而过的物象,此时应重新操作。 5.为什么 目镜测微尺必须用镜台测微尺校正,而且接物镜改变 , 校正也要改变? 目镜测微尺是放在接目镜的隔板上,用以测量经显微镜放大后的 细胞物象,因此在用目镜测微尺测量微生物大小前必须用镜台测微尺 校正;由于不同目镜和不同的物镜组合放大倍数是不一样的,目镜测 微尺每小格在不同条件下所代表的实际长度也是不同的,因此每次换 用物镜或目镜时都应重新校正。 6.高压蒸汽灭菌锅工作的基本原理? 加热时高压蒸汽灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽,待水蒸气急 剧的将空气从锅内排出去后,关闭排气阀,继续加热,此时,锅内蒸 汽压上升,使水的沸点升高,得到高于 100℃的温度。导致菌体蛋白 质凝固变性而达到灭菌的目的。 湿热灭菌效力比干热高的原因 :湿热中细菌吸水,蛋白质凝固所 需的温度降低 ,更易凝固;湿热的穿透性比干热的强 ;湿热的蒸汽有 潜热存在,能够迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力。 7.用于活菌计数的方法是哪些 ?各有何优缺点? 平板菌落计数法:将待测菌液经适当稀释后涂布在平板上;经过 培养后在平板上形成肉眼可见的菌落。统计菌落数,根据稀释倍数和 取样量计算出样品中细胞密度。 缺点 :待测样品往往不易完全形成单菌落 ,因此一个菌落不一定 是由一个细胞生长繁殖 而成 ,可能来自两个或多个细胞,因此平板菌落计数法得到的结 果往往比样品实际细胞数低 ;操作繁琐 ,结果需要培养一段时间才能 获得;测定结果受多种因素的影响。 优点 :直接反应样品中活细菌的数量。 8.细菌菌落特征的描述包括哪些方面 ? 形状、大小、颜色、中间是否凹凸、边缘是否光滑、菌落周围是 否有菌环等。 9.牛肉膏蛋白胨培养基包含哪些基本组分 ? 牛肉膏 3g、蛋白胨 10g、琼脂 15—20g、NaCl 5g、水 1000ml 10.微生物的分离为什么进行梯度稀释 ? 11.为什么进行倒置培养? 防止培养基被污染影响接种细菌的生长;这样可以防止养分沉淀 在培养基底部,可以给细菌提供充分的细菌。 12.何为 cfu ,通过分离培养对土壤细菌数量进行确定,为何可以 用 cfu ? Cfu :colony-forming unit 的缩写,菌落形成单位。由于待测样 品往往不易完全分散成单个细胞,平板上形成的每个菌落不一定是由 一个细胞生长繁殖而成的,有的可能来自两个或两个以上的细胞,因 此,平板菌落计数的结果往往比样

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