DB36T+1799-2023茶树菇菌种鉴定技术规程.docxVIP

ICS 65.020.20 CCS B 30 DB36 江 西 省 地 方 标 准 DB36/T 1799—2023 茶树菇菌种鉴定技术规程 Technical regulations of identification for Cyclocybe aegerita spawn 2023 2023 - 07 - 01 发布 2024 - 01 - 01 实施 江西省市场监督管理局 发 布 DB36/T 1799 DB36/T 1799—2023 DB36/T 1799 DB36/T 1799—2023 目??次 前言 II 范围 1 规范性引用文件 1 术语和定义 1 试剂和仪器 2 鉴定方法 2 附录 A（规范性）培养基制备 7 附录 B（规范性）试剂及其制备 8 附录 C（资料性）仪器 11 附录 D（规范性）拮抗反应类型 12 附录 E（资料性）试验用引物参照 13 I I 前??言 本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由江西省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：江西省农业科学院农业应用微生物研究所、江西省农业技术推广中心。 本文件主要起草人：王洪秀、魏云辉、龚正、胡佳、冯艳、孙鹏、陈绪涛、袁梦涵。 II II 茶树菇菌种鉴定技术规程 范围 本文件规定了茶树菇菌种鉴定的过程，包括试剂和仪器、样品制备、试验步骤、试验数据处理等内 容。 本文件适用于江西省茶树菇菌种鉴定。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 1097 食用菌菌种真实性鉴定 酯酶同工酶电泳法 NY/T 1730 食用菌菌种真实性鉴定 ISSR法NY/T 1845 食用菌菌种区别性鉴定 拮抗反应 术语和定义 NY/T 1845、NY/T 1097和NY/T 1730界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 茶树菇 Cyclocybe aegerita 茶树菇 Cyclocybe aegerita 隶属于真菌界Fungi Kingdom 、 担子菌门Basidiomycota 、 伞菌纲Agaricomycetes、伞菌亚纲Agaricomycetidae、伞菌目Agaricales、假脐菇科Tubariaceae、环伞属Cyclocybe， 分布于我国江西、福建、云南、浙江及四川等地。因其生长宿主的多样性及形态上的细微差别，又被称为杨树菇、柳松茸、柳环菌。生产上有褐色和白色两个品种。褐色品种特征：子实体单生或丛生。菌盖表面平滑，呈浅土黄色至暗红褐色；菌褶污黄褐色；菌柄较长，脆嫩，纤维质，表面有纤维状条纹，近白色；内菌幕膜质，开伞后菌环留在菌柄上部或沾附于菌盖边缘或自动脱落。白色品种特征：除菌盖、菌柄和菌褶呈白色外，其他形态特征基本同褐色品种，此品种又称雪莲菇。 3.2 菌种区别性 distinctness of spawn 供检菌种和对照菌种的不符合性。 [NY/T 1845，定义3.1] 3.3 隆起型 ridgy 对峙培养的茶树菇菌株间拮抗表现特征之一，表现为两菌株菌落交界处菌丝隆起。 1 [NY/T 1845，定义3.2] 3.4 沟壑型 chimb 对峙培养的茶树菇菌株间拮抗表现特征之一，表现为两菌株菌丝在交界处分别密集或稍微隆起，两 隆起之间出现一条沟壑状分隔线。 3.5 色线型 color bar 对峙培养的茶树菇菌株间拮抗表现特征之一，表现为两菌株菌落交界处形成一条色素分界线。 3.6 隔离型 dividing line 对峙培养的茶树菇菌株间拮抗表现特征之一，表现为两菌株菌落交界出现一条无菌丝的带状分隔 区。 3.7 菌种真实性 genuineness of spawn 供检菌种和对照菌种的符合性。 [NY/T 1097，定义3.1] 3.8 对峙培养法 face-off culture 两个不同的菌株对峙培养时发生拮抗反应，是茶树菇菌株识别异己保持群体遗传多样性的反应，它是由基因组内异核体不亲和位点控制的。当不亲和的两个菌株对峙培养时，在菌株交界处形成隆起、沟壑、色线或隔离，产生拮抗，防止遗传上明显不同的个体间菌丝融合，以保持个体遗传上的独立和稳定。 3.9 酯酶同工酶法 esterase isoenzyme method 在生物中，酶的表达受遗传基因的调控。酯酶是多等位基因调控的酶类，从食用菌菌丝体中提取的 粗酶液经电泳后，进行酯酶的生物化学染色，不同的酯酶组分显示在凝胶的不同位置而形成酯酶同工酶 酶谱。