2024北京生物高考专题复习--微专题 核酸序列阅读、分析.docxVIP

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第 第 PAGE 15 页 共 NUMPAGES 15 页 微专题 核酸序列阅读、分析   高考题常以各种科研文献为情境考查核酸序列的阅读、分析。   基因的两条链中只有一条具有转录功能,这条具有转录功能的链被称为模板链(非编码链),另一条互补链被称为非模板链(编码链)。在进行核酸序列的阅读、分析时,可只分析非模板链和mRNA链,这两条链的碱基排列顺序一致(只是mRNA不含T只含U)、方向一致(都从5端→3端),且都蕴含着基因的编码信息。注意,模板链中的核酸序列与编码蛋白质的mRNA的序列是互补的,在进行核酸序列阅读、分析时一般不选此链。 例1 (2022重庆,24节选)科学家用基因编辑技术由野生型番茄(HH)获得突变体番茄(hh),发现突变体中DML2基因的表达发生改变,进而影响乙烯合成相关基因ACS2等的表达及果实中乙烯含量(图Ⅰ、Ⅱ),导致番茄果实成熟期改变。请回答以下问题: 图Ⅱ (1)图Ⅰ中,基因h是由基因H编码区第146位碱基后插入一个C(虚线框所示)后突变产生,致使h蛋白比H蛋白少93个氨基酸,其原因是                     。基因h转录形成的mRNA上第49个密码子为    。另有研究发现,基因H发生另一突变后,其转录形成的mRNA上有一密码子发生改变,但翻译的多肽链氨基酸序列和数量不变,原因是          。? (2)图Ⅱ中,t1~t2时段,突变体番茄中DML2基因转录的mRNA相对量低于野生型,推测在该时间段,H蛋白对DML2基因的作用是             。突变体番茄果实成熟期改变的可能机制为:H突变为h后,由于DML2基因的作用,果实中ACS2基因           ,导致果实成熟期    (填“提前”或“延迟”)。? 答案 (1)h基因转录出的mRNA中,终止密码子提前出现 GCC 密码子具有简并性 (2)促进DML2基因的转录过程 表达延迟 延迟 1.鉴定基因突变 在鉴定基因突变时,要鉴定突变的位点、方式(是替换突变还是缺失或插入突变)以及是否发生了终止突变。一般来说,缺失或插入突变对编码的蛋白质的影响更大,如果缺失或插入的碱基数量不是3的倍数,会导致突变位点之后的密码子都发生变化;如果发生替换突变时,突变点密码子变成终止密码子,也会对编码的蛋白质产生较大影响。 例2 (2022山东,25节选)(2)PCR扩增得到的P基因经酶切连接插入载体后,与编码FLAG的序列形成一个融合基因,如图甲所示,其中“ATGTGCA”为P基因编码链起始序列。将该重组载体导入细胞后,融合基因转录出的mRNA序列正确,翻译出的融合蛋白中FLAG的氨基酸序列正确,但P基因对应的氨基酸序列与P不同。据图甲分析,出现该问题的原因是                                                    。修改扩增P基因时使用的带有EcoRⅠ识别序列的引物来解决该问题,具体修改方案是 ?  。? 答案 (2)P基因编码链的第一个碱基与EcoRⅠ识别序列的最后两个碱基编码一个氨基酸,导致mRNA的密码子被错位读取 在引物中的EcoRⅠ识别序列3端添加1个碱基   编码链与mRNA中碱基排列顺序一致(只是mRNA中不含T只含U),起始密码子是AUG,那么编码链核酸序列的阅读、分析就从ATG开始,三联体密码子阅读框架的改变会造成翻译结果的改变。若发生移码突变应再插入一定数量碱基对,保持原基因编码的密码子顺序不变。 例3 (2021山东,25节选)人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点,该位点结合BCL11A蛋白后,γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列,解除对γ基因表达的抑制,可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段,将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测,以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。 (1)为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达,需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知,在F1~F7末端添加的序列所对应的限制酶是    ,在R末端添加的序列所对应的限制酶是    。本实验中,从产物扩增到载体构建完成的整个过程共需要    种酶。? 答案 (1)SalⅠ EcoRⅠ 6 2.核酸序列的阅读、分析需要注意方向性 启动子位于目的基因的上游,终止子位于目的基因的下游。   质粒中不同基因的编码链可能不在同一条DNA单链上,所以方向可能不同,为了保证目的基因正确插入,一般采用双酶切,切出不同的黏性末端,保证目的基因按正确的方向插入。若目的基因两端没有合适的酶切位点,通过PCR技术扩增目的基因时可以在引物的5端加入酶切位点序列。 例4 (2020江苏,33节选)

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