石蜡切片与冰冻切片培训教程石蜡切片和冰冻切片优缺点比较项目.docx

白腊切片与冰冻切片培训教程 白腊切片和冰冻切片优弊端比较 项目 白腊切片 冰冻切片 目的及 定位正确 定位禁止，抗原易弥散， 抗原稳固性 定性快 抗原保真 需修复 活性好，易出阳性结果 酶活性 操作步骤 繁琐，耗时长 简略快捷 保留 室温，可长久保留 -80°C半年左右 切片厚度 2-5um，易得连续切片 5-10um，不易得连续切 片 制片成效 片子美丽，组织形态结 抗原易阳性，冰晶易导 构保留好，白腊自觉荧 致组织构造破坏 光有扰乱 合用 感染性标本，骨，钙化 临床快速诊疗，原位杂 一抗指定 组织，脂肪，小组织 交，免疫荧光，某些酶 的显示如ATP酶，琥珀 酸脱氢酶等 冰冻切片 概括：冰冻切片是将活组织快速冰冻、切片、染色，进行病理诊疗的方法。 主要应用:（1）快速病理诊疗（2）显示组织中的脂质（3）在组织化学上显示酶活性（4）神经组织学的镀银和镀金染色法（5）免疫荧光的研究 准备资料：（1）切片机刀片（2）冰冻包埋剂（3）液氮罐（4）液氮专用冻 存管（5）组织镊（6）手术刀或组织剪 （7）培育皿 （8）生理盐水 （9）粘 附载玻片 冰冻切片机仪器说明 1 功能键 功能键 UVC  说明 灯光开关按钮，用于冷冻箱照明。 手动除霜按钮，用于激活和停止手动除霜。 锁定按钮，锁定解锁定控制面板以防止无心改正输入的参数。要锁定或解锁定，按下约5秒。 用箭头所指的+和-键在钟型标志的面板上能够设置实质时间。按下或按钮超出1秒，时间值连续增添或减少（自动重复功能）。 说明 紫外灯开关按钮，用于冷冻箱消毒，开启后30分钟后自动熄灭 2 用箭头所指的+和-键设置自动除霜循环的开端。同时，时和分标志之间的LED闪耀。自动除霜循环每24小时进行一次。 用+和-键设置冷冻箱的温度。实质温度是标准读 数。要显示需要的数值，触摸+和-键。用+和-键置需要的数值。按下或按钮超出1秒，冷冻盒温度值连续增添或减少。达成设置后5秒将显示实质值。 用于激活Peltier元件冷冻快速冷冻站。一旦激活，制冷系统的压缩机将在40秒后启动以增强热传导效应。仪器无Peltier元件显示为“LL”，有Peltier元件显示为“PE”。 功能键说明 3 粗调退后按钮，用于标本远离刀片的快速挪动。 微调退后按钮，用于标本远离刀片的慢速挪动。 粗调行进按钮，用于标本凑近刀片的快速挪动。 微调行进按钮，用于标本凑近刀片的快速挪动。 （注意：以上粗调解微调按钮均可采纳点按步进挪动或长按连续挪动。） 冰冻切片操作流程 ①取材：手术过程中取下的新鲜组织，不可以太大太厚，厚者冰冻费时，大者难以切完好，大小约为24×24×2mm； ②设定冷冻温度：应视不一样的组织选择不一样的冷冻箱冷温度,冷冻不足没法切片，冷冻过分切片易碎，如：a软骨、睾丸、脾脏等高密度组织，冷冻箱温 度在-10～15℃；b甲状腺、脑、心脏、肌肉等组织，温度在-15～25℃；c肝、乳腺、膀胱等含脂肪的组织，温度在-25℃以下。 ③包埋冷冻：拿出组织标本盘，放平摆好组织，周边滴上包埋剂（一般为OCT），速放于冷冻台上，冰冻。小组织应先取一标本盘，滴上包埋剂让其先冷冻，再放上组织，滴上包埋剂冷冻。 ④修平组织：将冷冻好的组织块，夹紧于切片机标本头上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。 ⑤调理防卷板与切片：制作冰冻切片，重点在于防卷板的调理上，这就要求 4 操作者要仔细，正确地将其调较好，调校至适合的地点。调好切片厚度，切片 时，切出的切片能在第一时间顺利地经过刀与防卷板间的通道，平坦地躺在持刀器的铁板上。这时即可掀起防卷板，取一粘附载玻片，将其附贴上即可。 冰冻切片冷冻温度选择表 组织 10-15 15-25 25-50 肾上腺 骨髓 脑 膀胱 乳腺-脂肪 乳腺-较少脂肪 软骨 宫颈 脂肪 心脏和血管 小肠 肾脏 喉 唇 肝脏 肺 淋巴 肌肉 鼻 胰腺 前列腺 卵巢 直肠 皮肤带有脂肪 皮肤不带有脂肪 脾脏或血性组织 睾丸 甲状腺 舌 刮宫物 冰冻切片常有问题、原由、解决方法 常有问题原由解决方法 5 -标本不够冷 -设置较低的温度 切片拖尾现象 - 刀片或防卷板不够冷 -等到刀片或防卷板达到 冷冻箱温度 -刀片刃缘破坏 -使用刀片的不一样部位 切片褶皱 或改换新刀片 -防卷板边沿破坏 -改换防卷板 切片卷曲在防卷板上 防卷板未能伸出刀片刃 从头正确调理防卷板 缘足够远 -标本温度过低 -高升标本温度 -刀片的钝部、污垢、灰 -使用刀片的不一样部位 切片扯破 尘、霜冻或许生锈 -防 或改换新刀片 卷板顶缘破坏 -改换防卷板 -组织中有硬颗粒 -改换组织 -刀背的污垢 -洁净污垢 - 静电/气流 -去除原由 - 标本不够冷 -选择较低的温度 - 大面积标本 -平行修整标本，增添切 片厚度 - 防倾板地点错误 -从头搁置防