pda培养基高压蒸汽灭菌条件，高压蒸汽灭菌技术及培养基的灭菌.doc

 高压蒸汽灭菌技术及培养基的灭菌 1.了解加压蒸汽灭菌的原理及应用范围； 2.掌握高压蒸汽灭菌的操作流程和技术要点，学会使用高压蒸汽灭菌锅： 3.掌握高压蒸汽灭菌器的安全使用注意事项。 1.熟悉高压蒸汽灭菌锅的结构及工作原理； 2.用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌。 以小组为单位将配制好的培养基适当包扎、正确装入高压蒸汽灭菌锅，进行灭菌。 使用前在外层锅内加人适量的水，水量与三角搁架相平为宜，不可过少，否则易将灭菌 将内锅放在三角搁架上。培养基分装完毕后（分装参看项目四)，将待灭菌的物品放在内 锅单。放置不要过满，以免妨碍蒸汽流而影响灭菌效果。盖锅盖时将盖上的排气软管插到内 锅的排气槽内，然后将锅四周的固定螺旋以两两对称的方式旋紧。打开排气阀。 加热井同时打开排气阀，待锅内沸腾并有大量蒸汽自排气阀冒出时，维持5min以上， 以排除锅内冷空气，然后将排气阀关闭。如灭菌物品较大或不易透气，应适当延长排气时间： 当压力升至0.10MPa，温度达到121℃时，应控制热源、保持压力，维持20--30min后， 隔断热源，让灭菌锅自然降温。 当压力表降至“0”处后。打开排气阀，随即旋开固定螺旋，开盖，取出灭菌物。注意： 切勿在锅内压力尚在“0”以上时开启排气阀，否则会因压力骤然降低，而造成培养基剧烈 沸腾冲出管口或瓶口，污染棉塞，以后培养时引起杂菌污染。 灭菌后的培养基，一般需进行无菌检查。将做好的斜面、平板、培养基等置于37℃恒 温箱中培养1-2天，确定无菌后方可使用。