指示菌的检验—双歧杆菌的检验（食品微生物检验技术课件）.pptx

食品中双歧杆菌的鉴定 目录/Contents1 材料、试剂及设备鉴定程序结果报告食品商业无菌的检验23 01材料、试剂及设备设备和材料恒温培养箱；气相色谱仪配FID检测器；冰箱；天平：感量0.1 g；无菌试管：18 mmx180 mm、15 mmxl00 mm;无菌吸管：1 mL（具0.01 mL刻度）、10 mL（具0.1 mL刻度）或微量移液器（200 μL～1000μL）及配套吸头；无菌锥形瓶 01材料、试剂及设备培养基和试剂 双歧杆菌培养基；PYG液体培养基；甲醇；三氯甲烷；硫酸；冰乙酸；乳酸乙酸标准溶液；乙酸标准使用液乳酸标准溶液；乳酸标准使用液 02鉴定程序 02操作程序样品准备 样品的全部制备过程均应遵循无菌操作程序以无菌操作称取25g（或25mL）样品，置于装有225mL生理盐水的灭菌锥形瓶内，制成1：10的样品匀液 02操作程序稀释及涂布培养 制成1：100的样品匀液做10倍递增系列样品匀液选择3个连续的适宜稀释度，每个稀释度吸取0. 1mL稀释液，每个稀释度做2个平皿。置36℃±1℃培养48h±2h，培养后选取单个菌落进行纯培养 02操作程序纯培养 挑取3个或以上的可疑菌落接种于双歧杆菌琼脂平板，厌氧，36℃±1℃培养48h 02操作程序镜检及生化鉴定 涂片镜检。双歧杆菌菌体为革兰氏染色阳性，不抗酸、无芽孢，无动力，菌体形态多样，呈短杆状、纤细杆状或球形，可形成各种分支或分叉形态生化鉴定。过氧化氢试验为阳性。选取纯培养平板上的3个单个菌落，分别进行生化反应检测 02操作程序有机酸代谢产物测定 采用气相色谱法测定双歧杆菌的有机酸代谢产物双歧杆菌培养液制备标准液的配制：乙酸标准溶液；乙酸使用液；乳酸标准溶液；乳酸使用液方法：乙酸、乳酸的处理；气相色谱条件；结果计算 03报告 根据镜检及生化鉴定的结果、双歧杆菌的有机酸代谢产物乙酸与乳酸微摩尔之比大于l，报告双歧杆菌属的种名