4神经干动作电位的引导及神经兴奋传导速度的测定.doc

4神经干动作电位的引导及神经兴奋传导速度的测定 西安交通大学医学院教案 , 引导蟾蜍坐骨神经动作电位，并观察其基本波形（包括双相和单相动作电位）。 , 学习和掌握神经干动作电位传导速度测定的原理和方法。 , 学习和掌握蟾蜍坐骨神经-腓神经标本制备方法。 , 复习讲解神经干动作电位和神经纤维动作电位的区别、神经干动作电位形成的过程及神 经干兴奋传导速度的测定原理等。 , 制备坐骨神经—腓神经标本。 , 引导单、双相动作电位及测定兴奋传导速度。 , 神经干双相动作电位的形成机制。 , 兴奋传导速度的测定原理。 【】 1. 引导蟾蜍坐骨神经动作电位，并观察其基本波形（包括双相和单相动作电位）。 2. 学习和掌握神经干动作电位传导速度测定的原理和方法。 3. 学习和掌握蟾蜍坐骨神经-腓神经标本制备方法。 【】 动作电位是神经细胞兴奋的客观标志，当神经纤维或神经干受到有效刺激时，必然会 产生可传导的动作电位，也称为神经冲动。由于神经干动作电位是许多单根神经纤维动作 电位的复合，所以它的特征不同于单根神经纤维的动作电位。本实验采用离体细胞外记录 法，记录神经干兴奋时两个记录电极之间的电位变化。动作电位可沿神经纤维进行双向传 导，其传导速度取决于纤维直径、内阻、有无髓鞘等因素。通过测定动作电位传导的距离 和时间，可算出动作电位在神经纤维上的传导速度。 【】 1. 动物 蛙或蟾蜍。 2. 试剂和药品 任氏液 3. 装置和器材 计算机、蛙类手术器械、神经屏蔽盒、直尺、圆规、培养皿。 【】 1. 神经干动作电位的引导 1）制备坐骨神经-腓神经标本 制备方法与制备坐骨神经-腓肠肌标本基本相同，只是当把坐骨神经游离至膝关节后，在腓肠肌一侧继续分离腓神经至足趾，用线结扎，并在结扎 线远端剪断。将制备好的坐骨神经-腓神经标本浸入盛有任氏液的培养皿内备用。 2）将神经标本置于神经屏蔽盒的电极上。将神经的近中枢端置于刺激电极一侧，外周 端置于记录电极侧。 3）进入BL-410生物信号采集、处理系统，单击菜单栏中实验项目，在肌肉、神经实 验中选择神经干动作电位的引导。 4）观察刺激强度对动作电位幅度的影响。实验项目（单击）——肌肉、神经实验——阈强度与动作电位的关系——设置起始刺激强度、刺激增量与时间间隔——单击OK——观察显示器有双相动作电位出现。 5）在一对记录电极之间用镊子夹伤神经干，可见双相动作电位的第二相消失，成为单 相动作电位。测量动作电位潜伏期（刺激伪迹前沿到动作电位起始的距离），动作电位的幅度 和时程。 6）将计算机记录的双相、单相动作电位及刺激强度对双相动作电位的影响图经编辑后 打印出来。 7）增加刺激强度、放大倍数及扫描速度，观察记录神经干单相动作电位波形的变化。 2. 神经兴奋传导速度的测定 1）制备坐骨神经-腓神经标本。 2）由神经干屏蔽盒的两对引导电极处引导输入至计算机的一、二通道。 3）在菜单条的实验项目栏中找出肌肉神经系统实验中的神经干兴奋传导速度测定（单 击左键），屏幕上出现一个对话窗口，输入两对引导电极间的距离，确定后，按刺激启动，则 在一、二通道上分别出现一个动作电位，且显示出传导速度数据。还可以在显示方式菜单条 下找出比较显示方式，则可在第一通道中显示出两个通道的图形。(该实验模块直接将动作电位的潜伏期及刺激电极与记录电极之间的距离带入公式 V=（S2- S1）/（T2- T1）计算出神经干的兴奋传导速度) 3．如果使用scope软件，进入主界面后，参数设置如下。Input A的参数：range20-100mV, AC选(?)，滤波选（?），Negative选(?)，点击OK。时基（Time Base）选100KHz, Sample选1280，Time选10ms。选择通道B显示刺激信号。设置刺激：去掉隔离刺激（Isolated Stimulator）选项，刺激方式为Pulse, 延时为5ms, 刺激波宽为0.2ms , 刺激幅度为0.3—0.4V,电压范围为1V。引导双相动作电位时，设置单个刺激，逐渐增大刺激强度，观察双相动作电位在一定范 围内随刺激强度的增加而增大（固定刺激的另外两个参数）。测定兴奋传导速度时，选择合适 的刺激强度，引导出双相动作电位，记录其潜伏期及刺激电极到记录电极之间的距离，记作 T、S，改变刺激电极与记录电极之间的距离，记录T、S，将其带入公式V= (S-S)/(T-T),算出传导速度。 4．剪辑图形，打印结果、书写实验报告。 【】 1. 神经干应平直地置于电极之上，两端不可与屏蔽盒接触，也不可把神经干两端缠 绕于电极之上，两端任其自然悬空。 2. 应适时给神经干滴淋任氏液，以保持标本湿润。 3. 刺激强度应由小逐