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通用腺病毒骨架载体（pAdEasy-1 ）产品说明书（中文版）
主要用途
通用腺病毒骨架载体（pAdEasy-1 ）是一种与穿梭载体在特定细菌中同源重组构建产生重组腺病毒的改造
型人腺病毒 5 型的主干基因分子。适用于病毒感染性基因疗法的载体。产品即到即用，性能稳定，重组保
证。
技术背景
pAdEasy-1腺病毒骨架载体含有人腺病毒5型的大部分基因组，去除E1和E3病毒基因，旨在提供外源性DNA
插入整合，同时避免病毒自我复制。其中E1基因的剔除，使病毒在宿主细胞内失去DNA复制能力，而不能
产生传染性病毒颗粒；E3基因的剔除，可以避开宿主的免疫反应。pAdEasy-1为33.5kb，具有氨苄青霉素抗
性，一旦与穿梭载体重组，其抗性消失。同时具有内切酶Pac 1和Cla1的位点。
产品内容
载体液（Reagent A ）（100 纳克/微升 ） 5 微升
产品说明书 1 份
保存方式
保存在－20 ℃冰箱里，有效保证 6 月
用户 自备
BJ5183 ：用于载体转化重组的宿主细胞
实验提示
1． 通常 1 次转化用量为 100 纳克
2 ． 使用 BJ5183 进行转化后重组
3 ． 建议和线性穿梭载体（1 微克）共转染
4 ． 建议使用电转为优先
5 ． 转化后细菌培养不宜在 BJ5183 里超过 20 小时
6 ． 转化后的阳性细菌菌落通常比正常菌落小三分之一
注意事项
1． 本产品为 5 微升（500 纳克）规格
2 ． 操作时，须戴手套
3 ． 严格无菌操作
4 ． 载体转化后的菌落越小，转染阳性可能性越高；BJ5183 的转化效率通常较之其它细菌要高
5 ． 转染的载体越大，转化效率越低，载体拷贝数越低，菌落后续培养越慢；大于 40kb 的载体，其琼脂平
板上的菌落阳性率至多为 20 ％
6 ． 不能使用常规质粒抽提方法提取载体；建议使用 煮沸法质粒/ 柯斯质粒 DNA 快速抽提试剂盒－
HL60004，既适合大型质粒提取，又避免质粒切口产生
7 ． 使用Pac 1 （50 单位）进行酶切鉴定，其电泳条带为 30kb 和 3kb （或 4.5kb ）
8 ． pAdEasy-1 腺病毒骨架载体基本信息如下：
9 ． 本公司提供系列腺病毒试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2 ． 本产品经鉴定重组保证
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