异源性输血对兔失血性休克的急救作用.docx

异源性输血对兔失血性休克的急救作用 异常性休克（大于总血流量的30%35%）发生时。如果患畜的失血量过大或救治不及时,可发展至不可逆损害甚至发生多系统器官功能衰竭,病死率高,危害较大。 输血在临床上作为一种特殊的治疗手段,血液供应的短缺是动物临床输血面临的难题。异源输血能很好的解决血液来源问题,但由于血型不配等因素能引起一系列的输血不良反应,比如发热反应、过敏反应、溶血反应、输血相关性急性肺损伤等免疫性反应及一些非免疫性反应。成分输血法能较好的解决这些问题。成分输血就是把全血用物理或化学的方法,分离并制成各种较浓和较纯的制品供临床使用。这种方法避免了不需要的血液成分可能引起的副作用或产生免疫反应。输入脱敏猪红细胞是一种成分输血法。猪血是常用的异源血液来源,如今已经完成了对它的人源化改造,很有可能成为人类血液的替代品。 本研究通过建立兔失血性休克模型及输入脱敏猪红细胞,旨在探讨对失血性休克兔异源输血急救的可能性。 1 材料和方法 1.1 材料表面 1.1.1 实验动物 健康新西兰兔6只,10 kg～15 kg临床健康猪1头。 1.1.2 方面,云 肝素钠(上海生工)、无菌生理盐水、α-半乳糖苷酶(sigma公司),兽用溶血剂(V-28CFL无氰溶血剂),兽用清洗液(V-28E E-Z清洗液),兽用稀释液(V-28D稀释液),兽用清洗液(V-28R冲洗液),以上均由深圳迈瑞医疗电子股份有限公司生产。 1.1.3 血液流变学监测 Uritest-150型尿液分析仪、BC-2008 Vet血液分析仪、超净工作台、离心机、显微镜、离心管、一次性使用无菌注射器、供血输液器等。 1.2 方法 1.2.1 血液样本的处理 耳静脉采集猪血,肝素钠抗凝,按文献处理获得脱敏红细胞,用生理盐水稀释成全血等体积的红细胞悬液备用。 1.2.2 城外血液供应试验 取20 μL脱敏猪红细胞悬液和40 μL兔全血混合,室温放置15 min,肉眼和显微镜下观察红细胞凝集程度,无凝集反应则可进行输血。 1.2.3 临床指标的确定 对购得的新西兰兔连续3 d观察其体温、呼吸、脉搏、可视黏膜、采食、精神、粪尿等临床指标。确定其处于临床健康状态后进行试验。观察输血中和输血后兔体温、呼吸、脉搏、可视黏膜、采食、精神、粪尿等临床指标。 1.2.4 生理生化指标的测定 对健康新西兰兔进行一次血常规、尿常规测定,确定其处于生理健康状态。测定兔失血后血常规、尿常规,进行比较分析。 1.2.5 异源输血试验 将6只健康兔随机分成2组,每组3只,称重。 一组:按体重12 mL/kg放血,作为试验组进行异源输血。 二组:按体重12 mL/kg放血,作为对照组。 1.2.6 失血治疗后的血常规 采用心脏放血处理后,对试验组兔耳缘静脉采血,进行血常规测定。 1.2.7 试验组异源输血 试验组兔经耳缘静脉输入等量放血量的猪红细胞,在输血后每天进行1次血常规、尿常规测定,直到各指标正常。 2 结果 2.1 失血性休克兔进行紧急异源输血后温度变化 试验组兔失血后出现皮肤湿冷、呼吸浅促、心率增快、脉搏增快、可视黏膜颜色苍白、精神委靡、意识障碍、粪尿明显减少等症状。在输血后呼吸脉搏恢复正常,可视黏膜颜色恢复,精神状态良好,粪尿量正常。对照组兔精神委靡、粪尿减少,食欲不振。从图1可知,发生失血性休克后,兔体温下降近1 ℃;试验组兔进行紧急异源输血后,体温30 min内立即上升至正常值并在输血1 d后微高于正常值,在输血后第2天体温下降到正常范围并相对稳定。对照组失血后体温亦有上升,但仍低于正常值并于失血16 h后死亡。 2.2 血液中几种免疫细胞的变化 2.2.1 急救后各细胞数目变化 从图2～图5可以看出,兔淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、白细胞数目变化趋势相似,在失血后均有所下降,试验组兔输血急救后,各细胞数目均有明显的升高,在第3天后白细胞数目基本恢复正常值,并趋于稳定。而对照组兔失血后,各细胞数目有所上升,但仍低于正常值。 2.2.2 血红蛋白含量检测 从图6可以看出,试验组兔在失血后血红蛋白含量有所下降,当输血急救后,血红蛋白含量均有明显的升高,在第3天血红蛋白含量基本恢复正常值,并趋于稳定。而对照组兔失血后,血红蛋白含量有所上升,但仍低于正常值。 2.3 输血前后兔在尿中总隐血含量的变化 试验组失血及输血前后兔尿蛋白质、胆红素、尿胆原、白细胞等指标均保持为零不变,只有隐血含量在输血前后发生变化。从图7可以看出,试验组兔在输血后尿中出现不同程度的隐血。而失血对照组兔没有出现隐血,但尿量急剧减少,并各指标均正常。 3 失血性休克在血压病理的作用 本研究首次对兔的失血性休克进行异源红细胞输血研究,输血急救的兔存活,而未输血兔均死亡,在输血过程中未出现明显的过敏反应,表明对猪红细胞的修饰处理与异