20种杀菌剂对蛀球孢菌褐斑病的抑制作用.docx

20种杀菌剂对蛀球孢菌褐斑病的抑制作用 棕榈树是中国冷季草坪最常见、最严重的疾病之一。它也是茎叶属植物科最严重的夏季疾病之一。褐斑病爆发时会引起果岭草坪大面积死亡,是高尔夫球场草坪质量管理中最大的难题之一。草坪褐斑病是一种土传真菌病害,主要由立枯丝核菌Rhizoctonia solani引起。迄今为止,立枯丝核菌已鉴定出12个菌丝融合群,Blazier和Conway的研究发现感染褐斑病的不同草种其立枯丝核菌融合群有明显的差异,Kataria等的研究指出不同的立枯丝核菌融合群对杀菌剂的敏感性也不同。致病菌的这些差异给草坪褐斑病的有效防治带来了一定的困难。早在1917年国外就开始对草坪褐斑病进行防治研究,在生态防治、化学防治及生物防治等方面均有过一些报道[5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15]。国内有关草坪褐斑病的研究相对较少,尚缺乏能够显著控制褐斑病危害的有效药剂,仅有的几篇褐斑病药剂筛选研究也都是针对高羊茅Festuca arundinacea、草地早熟禾Poa pratensis等园林绿化草种,针对匍匐翦股颖草坪褐斑病的药剂筛选还未见报道。从感染褐斑病的匍匐翦股颖果岭草坪上分离出立枯丝核菌,采用生长速率法比较了20种不同类型杀菌剂对该致病菌菌丝生长的抑制效果,旨在筛选出抑菌效果显著的杀菌剂,为我国匍匐翦股颖草坪褐斑病的有效防治提供理论依据。 1 材料和方法 1.1 试验材料 1.1.1 试验剂 采用的20种杀菌剂情况见表1。 1.1.2 黄瓜片的制备 2005年9月从上海交通大学实验农场沙坪果岭已感染褐斑病的匍匐翦股颖植株上分离出立枯丝核菌。具体分离方法:从匍匐翦股颖上采集感病严重的病叶,冲洗净表面沙土后,于病健交界处剪取5 mm长的小段,用75%酒精表面消毒3次,无菌水冲洗3遍,洗净。移植到无菌的黄瓜片上,置于培养皿中25 ℃下保湿培养。24 h后将新长出的菌丝尖段转接到CMA培养基(玉米粒60 g煮沸1 h后,定容到1 000 mL;琼脂18~20 g溶化,121 ℃下常规高压灭菌20 min)上纯化。再将纯化后的真菌转接到PDA培养基上,25 ℃恒温培养,经柯赫氏证病律证实后,备用。 1.2 试验计划和方法 1.2.1 含药培养基平板的制备 将表1中的20种供试药剂按照各自的推荐的质量浓度(见表2)配好后, 加入 熔融状态的水琼脂培养基制成含药培养基平板(1 mL药剂∶20 mL培养基)。切取PDA平板上的菌落边缘菌饼(直径为4.62 mm),移接至含药培养基(直径为96.10 mm)中央。每处理重复3次,设无药培养基(直径为96.10 mm)为对照。25 ℃下恒温培养,观察。 1.2.2 质量浓度筛选 将药剂筛选中抑菌效果显著的杀菌剂分别设4个质量浓度梯度,比较不同质量浓度下的抑菌效果以确定适宜的用药质量浓度。具体操作同上。 1.3 药剂相对抑菌率测定 接种后将各处理在25 ℃条件下恒温培养7 d,待对照培养皿中的菌丝长满时,采用十字交叉法测定各处理的菌落直径,计算菌落的净生长量及药剂的相对抑菌率。 净生长量=培养后菌落直径-接种菌饼直径 相对抑菌率=对照菌落直径?处理菌落直径对照菌落净生长量×100%=对照菌落直径-处理菌落直径对照菌落净生长量×100% 运用SAS6.12统计分析软件对试验数据进行方差分析,并采用邓肯氏新复极差法检测各处理间的差异显著性。 2 结果与分析 2.1 抑菌率:100%以上,抑菌率共产生2. 推荐质量浓度下,参试的20种杀菌剂对立枯丝核菌的抑制效果间存在不同程度差异。杀毒矾、腈菌唑、丙环唑的抑菌效果最好,抑菌率均达到100%。退菌特、三唑酮、百菌清、腐霉利、克露、金雷多米尔等药剂也表现出较好的抑菌效果,抑菌率都在92%以上。甲基托布津、农用链霉素、嘧菌酯、安克、普力克、毒克、井岗霉素、多菌灵、菌立停、敌克松的抑菌效果相对较差,抑菌率显著低于杀毒矾、腈菌唑、丙环唑等杀菌剂(表2)。 2.2 克露、转变及其他双溶剂对枯丝核菌的抑菌效果 除百菌清外,其他参试药剂的抑菌效果均随药剂处理质量浓度增加而提高。丙环唑在最低处理质量浓度(6 mg/L)时抑菌率仍高达100%,表现出极强的抑菌效果。杀毒矾质量浓度在38 mg/L、腈菌唑在7 mg/L以上时的抑菌率也都达到100%,但低于这2个质量浓度时,抑菌率均下降至96%左右。因此,丙环唑、杀毒矾、腈菌唑对立枯丝核菌的最佳抑制临界质量浓度可分别暂定为6、38和7 mg/L。 克露和金雷多米尔这2种药剂在最高质量浓度处理下(克露86 mg/L、金雷多米尔81 mg/L),抑菌率也可达到了100%。但随着药剂质量浓度的下降,抑菌效果也显著下降。克露29 mg/L、金雷多米尔27 mg/L时的抑菌率分别只有76.3%和58.9%。在本测试