第九章 紫外—可见分光光度法(Ultraviolet and Visible.pptxVIP

第九章 紫外—可见分光光度法 （Ultraviolet and Visible Spectrophotometry）;;学习要求;9.1 概述;9.1.1 光的基本性质;电磁波谱;表9-1;9.1.2 物质的颜色与光的关系;;吸收光谱(absorption spectrum)或吸收曲线;E=h?v=h(C/λ) 分子的吸收光谱是与其相应的电子能级特征相关的。同时也与振动和转动能级有关。;9.2 光的吸收定律—Lambert-beer定律;透光度、吸光度与溶液浓度及液层宽度的关系 （9-4）溶液浓度与宽度的乘积与吸光度成正比，而不是与 透光度成正比。以上两式中k是比例系数，与入射光波长、溶液的性质及温度有关。当入射光波长和溶液温度一定 时，k代表单位浓度的有色溶液放在单位宽度的比色皿中的吸光度.。当c的单位为g·L-1，b的单位为cm时，k以a 表示，称为吸光系数 ( absorption coefficient) ， 其单位为L·g-1·cm-1，此时式（9-3）变为 (9-5);如果浓度c的单位为mol·L-1，b的单位为cm，这时k常用;;2+;例 9-2 某有色溶液，当用 1 cm 比色皿时，其透;;例 9-3 用氯磺酚法测定铌， 50 mL 溶液中含铌 50.0 μg ， 用 2.0cm比色皿测得吸光度为0.701，求桑德尔灵敏度。 解: 已知A=0.701，b=2.0cm，M(Nb)=92.9g·mol-1;定量分析时，通常液层厚度是相同的，按照比尔定律，浓度与吸光度之间的关系应该是一条通过直角坐标原点的直线。但在实际工作中，往往会偏离线性而发生弯曲，见图9- 4中的虚线。若在弯曲部分进行定量，将产生较大的测定误差。;朗伯一比尔定律只对一定波长的单色光才能成立，但在实际工作中，即使质量较好的分光光度计所得的入射光，仍然具有一定波长范围的波带宽度。在这种情况下，吸光度与浓度并不完全成直线关系，因而导致了对朗伯一比尔定律的偏离。所得入射光的波长范围越窄，即“单色光”越纯，则偏离越小。;由于溶液本身的原因所引起的偏离;溶质的离解、缔合、互变异构及化学变化也会引起偏离。其中有色化合物的离解是偏离朗伯—比尔定律的主要化学因素。例如，显色剂KSCN与 Fe3+形成红色配合物Fe(SCN)3，存在下列平衡： Fe(SCN)3 Fe3++3SCN－ 溶液稀释时，上述平衡向右，离解度增大。所以当溶液体积增大一倍时，Fe(SCN)3的浓度不止降低一半，故吸光度降低一半以上，导致偏离朗伯 —??尔定律。;9.3 紫外—可见分光光度计及测定方法;;;;;分光光度计的主要类型;双光束型;光电二极管阵列型（DAD);标准曲线法 其方法是先配制一系列浓度不同的标准溶液，用选定的显色剂进行显色，在一定波长下分别测定它们的吸光度A。以A为纵坐标，浓度c为横坐标，绘制A-c曲线，若符合朗伯—比尔定律，则得到一条通过原点的直线，称为标准曲线。然后 用完全相同的方法和步骤测定被测溶液的吸光度，便可从标准曲线上找出对应的被测溶液浓度或含 量，这就是标准曲线法。 在仪器、方法和条件都固定的情况下，标准曲线可以多次使用而不必重新制作，因而标准曲线法适用于大量的经常性的工作。;;标准对照法(直接比较法) 将试样溶液和一个标准溶液在相同条件进行显色、 定容，分别测出它们的吸光度，按下式计算被测溶液的浓度。;3．吸光系数法 在没有标准品可供比较测定的条件下，按文献规定条件测定被测物的吸光度，从样品的配制浓度、测定的吸光度及文献查出的吸光系数即可计算样品的含量，因为;例9-4;这种被测元素在某种试剂的作用下，转变成有色 化合物的反应叫 显色反应 （ color reaction ），入试剂称为显色剂(color reagent)。 常见的显色反应大多数是生成配合物的反应，少数 是氧化还原反应和增加吸光能力的生化反应。;;9.4.2影响显色反应的因素;;;;9.5 紫外—可见分光光度法的误差和测量条件的选择;;9.5.2分光光度法测量条件的选择;;;9.6 紫外—可见分光光度法应用实例;9.6.1单组分含量测定;实例二：磷钼蓝法测定全磷 用浓硫酸和高氯酸（HClO4）处理样品，使磷的各种;9.6.2多组分含量测定 溶液的总吸光度等于各组分的吸光度之和： A=A1+A2+A3+……+An 吸收峰互不重叠 A、B两组分的吸收峰 相互不重叠，则可分别在处用单组分含量测定法测定组分A和B。;吸收峰相互重叠 A、B两组分的吸收峰相互重叠，可分别在和处测出A、B两组分的总吸光度 A1和A2，然后根据吸光度的加和性列联立方程： 在 处， 在 处，;导数分光光度法;导数分光光度法的应用;导数光谱消除宽背景吸收干扰图例;9.6.3配合物组成的测定;;59;9.6.4 紫外分光光度法定性分析