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中药治疗急性湿疹的配伍应用
湿伤口属于中医学的“湿伤口”范畴。外部原因主要是风、湿和热。湿热积聚在皮肤上,充满水分和热量。五倍子具有解毒消肿、收湿敛疮的功效,黄柏与黄芩均具有清热燥湿、泻火解毒之功,为外用治疗湿疹,皮炎等皮肤科疾病的常用中药。在临床上五倍子常与黄柏、黄芩配伍使用。在查阅的近10年文献中,有多篇文献记录五倍子与黄柏提取物配伍、五倍子与黄芩提取物配伍应用于湿疹、皮炎、烧烫伤的治疗。有学者在外用中药对急性湿疹治疗作用的实验研究中发现,五倍子具有抑制细菌及真菌的作用,黄柏具有抗炎及抑制细菌的作用,黄芩具有抗炎、抑菌及抗过敏的作用。但是五倍子和黄柏、黄芩分别配伍后对药效产生了不同影响。本文从抗炎、抗过敏和抑菌方面考察五倍子和黄柏、黄芩分别配伍对急性湿疹治疗作用的影响,探讨中药的配伍应用,优选治疗急性湿疹的配伍组合,为临床应用提供依据。
1 材料表面
1.1 细胞器
昆明小鼠,26~30 g,雌雄各半,共140只;以上动物均由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。实验菌种:金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus),大肠埃希氏菌(Escherichia coli),铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。
1.2 基质、唇膏的制备
中药提取物的制备:采用乙醇回流提取,分别加10倍和8倍量乙醇,各提取50 min后回收乙醇,浓缩,干燥,粉碎得固体粉末;药材配比:黄芩与五倍子配伍的生药量配比为2:1,黄柏与五倍子配伍的生药量配比为2:1;软膏基质:PEG400和PEG4000(6:1);软膏制备:取含生药量为黄芩10 g、黄柏10 g、五倍子5 g的提取物或不同配伍的提取物,加至一定的基质中,使之总重为50 g,过胶体磨后得软膏;艾洛松,上海先灵葆雅制药有限公司;除湿止痒软膏,四川同人泰药业有限公司,批号100402;二甲苯,北京化工厂,批2、4-二硝基氯苯(DNCB),天津市光复精细化工研究所丙酮,北京化工厂,批脱毛膏,广州诺菲化妆品有限公司,批号10RF9002。培养基:MH(A)培养基,批MH(B)培养基,批沙保弱氏肉汤培养基:自制,沙保弱氏琼脂培养基:自制。
2 实验方法
2.1 试验分组和给药
26~30 g雄性小鼠70只,随机分为7组,每组10只。即对照组,阳性药艾洛松组,黄柏组,黄芩组,五倍子组,黄柏五倍子组,黄芩五倍子组。于小鼠右耳前后两面分别涂以相应的受试药物0.2 g/只,对照组涂以等量的赋形剂,每日2次,连续3 d,第4天涂药后1 h各组以蒸馏水洗去药物,用干棉球擦净。然后各组小鼠右耳前后两面涂以二甲苯0.04 mL/只,左耳作对照。于致炎后2 h后处死动物,用7 mm打孔器将小鼠左右耳同等部位等面积切下,用电子天平称重,以左右耳片重量之差为肿胀度,作为炎症反应强度的观测指标。
2.22、 单次给药致敏
实验小鼠70只,随机分为7组:即对照组,阳性药除湿止痒软膏组,黄柏组,黄芩组,五倍子组,黄柏五倍子组,黄芩五倍子组。每组10只。分组后将各组小鼠腹部剃毛,面积3×3 cm2。随后对照组给予赋形剂,其余各组给相应的受试药1次,24 h后用5%DNCB的丙酮溶液100 μL涂于各小鼠腹部剃毛区致敏,对照组不涂。随后各组每天早晚各给药1次,连续8 d。致敏6 d后用1%DNCB溶液20 μL涂于各小鼠右耳廓激发给药。于诱发24 h后(最后1次给药后1 h),断颈处死小鼠,用7 mm的打孔器在小鼠双耳相同部位打下等面积耳片,置于电子分析天平上称重。计算两耳重量之差,作为超敏反应的观测指标。
2.3 不同浓度从总体上看细菌感染
黄柏提取物浓度为0.2 g/mL,黄芩提取物浓度为0.2 g/mL,五倍子提取物浓度为0.1 g/mL,黄柏五倍子浓度为0.3 g/mL,黄芩五倍子浓度为0.3 g/mL。哌拉西林舒巴坦那浓度分别为200 mg/L(用于金黄色葡萄球菌)和2000 mg/L(用于大肠埃希氏菌和铜绿假单胞菌)。
取无菌24孔平板若干个,用相应的培养基稀释受试药,黄柏提取物最终浓度分别为:0.1、0.05、0.025、0.013、0.006、0.003 g/mL,黄芩、五倍子同黄柏;黄柏五倍子最终浓度分别为0.3、0.15、0.075、0.038、0.019、0.009 g/mL,黄芩五倍子组同黄柏五倍子组。对照药为哌拉西林舒巴坦那终浓度为1000 mg/L(用于大肠埃希氏菌和铜绿假单胞菌)和100 mg/L(用于金黄色葡萄球菌)。每孔装1 mL,每毫升含药量呈一定比例递减。然后在每孔加入10 μL经稀释的新鲜菌液。置37 ℃的培养箱内培养18 h后观察有无细菌生长,如果药
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