凝胶渗透色谱.ppt

凝胶渗透色谱;色谱原理 流动相:载气 固定相:固体吸附剂等; 图 气相色谱对样品分离过程示意图;色谱谱图解析 一 谱图表示方法: 横坐标 时间 纵坐标 检测器响应信号的大小 色谱图 ;色谱图的解析: 色谱峰的位置 色谱峰的大小和形状 色谱峰的分离 保留值: 保留时间 死时间 调整保留时间 与固定液用量有关 比保留体积 相对保留值 保留指数;色谱过程方程: VR=VM+VR’ VR=VM+KVS 色谱的保留值与热力学系数联系起来 色谱流出曲线方程：——研究色谱峰形 　　塔板理论：高斯分布曲线 　　标准偏差： ;描述色谱峰大小的参数： 　　峰高h 　　峰宽Ｗ 分离度：描述峰分离情况 　　　　分离因素：保留值　　峰窄 　　　;色谱定性分析－－依据保留值 　　与已知组分的保留值相比 　　与其它分析方法连用　如ＩＲ 色谱定量分析——峰高或峰面积判断分析物　　　　　　　　　　　　　　的含量 色谱优缺点： 　　高效快速分离技术 　　难以鉴别分离组分;1.GPC的基本机理; 尺寸不同的高聚物分子，按其分子大小能自由地渗透进和渗透出这些凝胶孔洞。 凝胶孔洞与分子尺寸是相适应的，超过这个尺寸的大分子就不能渗透进去，它们只能随溶剂的流动而在凝胶粒子之间的空间中流动。因此，大分子比起小分子来说，在柱中的行程就短得多。 根据大小分子不同的行程就可以把混在一起的高聚物分子逐级分离开来，先分离出来的是大分子，较小的聚合物分子受到溶剂分子的排斥也随后分离出来，然后再用一定的方法检知每级中溶质的浓度和分子量。; 根据这一经典原理，用于测定高聚物的分子量是很适宜的，因为它易于实现自动化，而且分析的重复性好。;2.凝胶色谱仪;2.1间接测定法;2.2粘度法;2.3光散射法;采用瑞利比Rθ来描述散光： 式中Io和I分别代表入射光和散射光强度；r代表观测点与散射中心的距离。 LALLS与一般光散射方法相比，其特点是可以在θ→0和C→0的条件下???定，使计算大大简化， R θ和溶质的重均分子量Mw的关系为 式中，A2为第二维利系数，需事先测定，K为仪器常数： ; 式中，N为阿佛加德罗常数；λ使入射光波长；n是溶液的折光指数。当测定溶液的浓度C→0时，该项可忽略。这样式子可以化简为： 式中的C为流出液中样品的浓度。因此在GPC中，只要有浓度型检测器和LALLS联用，就可以直接测出液中样品的重均分子量。;实验部分; 泵系统： 包括一个溶剂储存器、一套脱气装置和一个高压泵。它的工作是使流动相（溶剂）以恒定的流速流入色谱柱。泵的工作状况好坏直接影响着最终数据的准确性。越是精密的仪器，要求泵的工作状态越稳定。要求流量的误差应该低于0.01mL/min。; 色谱柱： GPC仪分离的核心部件。是在一根不锈钢空心细管中加入孔径不同的微粒作为填料。 填料（根据所使用的溶剂选择填料，对填料最基本的要求是填料不能被溶剂溶解）：交联聚苯乙烯凝胶（适用于有机溶剂，可耐高温）、交联聚乙酸乙烯酯凝胶（最高100℃，适用于乙醇、丙酮一类极性溶剂）多孔硅球（适用于水和有机溶剂）、多孔玻璃、多孔氧化铝（适用于水和有机溶剂） 柱子：玻璃、不锈钢 ; 检测系统： 通用型检测器：适用于所有高聚物和有机化合物的检测。有示差折光仪检测器、紫外吸收检测器、粘度检测器。 示差折光仪检测器：溶剂的折光指数与被测样品的折光指数有尽可能大的区别 紫外吸收检测器：在溶质的特征吸波长附近溶剂没有强烈的吸收。 选择型检测器：适用于对该检测器有特殊响应的高聚物和有机化合物。有紫外、红外、荧光、电导检测器等。 ;实验部分; 色谱柱： 每根色谱柱都有一定的相对分子质量分离范围和渗透极限，色谱柱有使用的上限和下限。色谱柱的使用上限是当聚合物最小的分子的尺寸比色谱柱中最大的凝胶的尺寸还大，这时高聚物进入不了凝胶颗粒孔径，全部从凝胶颗粒外部流过，这就没有达到分离不同相对分子质量的高聚物的目的。而且还有堵塞凝胶孔的可能，影响色谱柱的分离效果，降低其使用寿命。色谱柱的使用下限就是当聚合物中最大尺寸的分子链比凝胶孔的最小孔径还要小，这时也没有达