药学微生物技术（实验课）全套PPT课件.pptx

培养鉴定细菌、放线菌和真菌任务 常用仪器的使用;超声波清洗仪的使用;加水 放入待清洗的器皿 加入去污粉 设置参数：温度60℃、时间20-30min 启动;高压蒸汽灭菌器;检查水位，加水 装入待灭菌物品 设置参数121℃，20min 加热和排冷气 关闭排气阀，升压升温至121℃ 开始倒计时20min 降压至0，排出热气，取出物品;;鼓风干燥箱;超净工作台;超净工作台的使用;;酒精灯：500oC;;酒精灯的火焰： ：外焰、内焰、焰心 （外焰温度最高） ;第一步：左手扶灯壶，右手向上打开灯帽，将灯帽竖立放在桌面上 ;第二步：用火柴点燃酒精灯;第三步：使用外焰灼烧灭菌（外焰温度最高）;使用酒精灯前要注意事项;酒精灯使用时注意事项;2、;酒精灯使用时注意事项;酒精灯的使用小结：两查两禁一不可;项目一 培养细菌、放线菌和真菌任务一 准备培养器皿;理论基础;理论基础;理论基础;干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。干热灭菌170℃，2h。 高压蒸汽灭菌利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目。一般121℃，15～30min可达到彻底灭菌的目的。 ;　布置任务;课次;包装微生物培养器皿;准备用品 ;认识常用的器具;培养皿;三角烧瓶（Erlenmeyer flask）;载玻片(Slide)与盖玻片(Coverslip);接种工具;试管（Test tube）;烧杯（Beaker）;微量吸管（Micropipette）;常用的接种工作;一、清洗玻璃器皿 1、新购入的玻璃器皿 　5%盐酸浸泡过夜，水冲，洗衣粉水刷，冲水，过蒸馏水，晾干或烘干，包扎，灭菌备用。 ;2、用过的玻璃器皿 　先灭菌，趁热将内容物倒掉后，浸泡，清洗,过蒸馏水，包扎，灭菌。;清洗玻璃器皿达到的要求;二、干燥玻璃器皿;三、包装玻璃器皿 局部包装和全包装;准备器材;实践操作;实践操作;04实实践操作 ;实践操作;实践操作;实践操作;请同学们思考;常用培养器皿名称 清洗的方法 干燥的方法 包装的方法 灭菌的方法 ;干热灭菌步骤;检查水位，加水 装入待灭菌物品 设置参数121℃，20min 加热和排冷气 关闭排气阀，升压升温至121℃ 开始倒计时 降压至0，排出热气 取出物品;项目一培养细菌和、放线菌和真菌 任务二 配??培养基;布置任务;任务分配： 1、牛肉膏蛋白胨培养基的配制（细菌） 2、高氏合成一号培养基的配制（放线） 3、察氏培养基（霉菌） 4、马铃薯培养基（酵母菌） ;每位同学： 固体培养基100mL、液体培养基100mL 在烧杯内配制，可以按小组合作配制。 1、固体培养基分装于2支试管内，每管约10mL，试管高度的1/5处，2支试管包装在一起、标记。 2、固体培养剩余的约80mL置于锥形瓶内，包扎、标记 3、液体培养100mL置于锥形瓶内，包扎、标记 作业：称量、溶解、（过滤）（调pH)、分装、包扎标记 以上各步骤的照片6张左右，提交到：知到APP作业实验任务二配制培养基，知到最多可上传9张照片，并可上传1分钟左右的实验小视频。;Page ;1、培养基成分 应含有碳源、氮源、无机盐、生长因子及水等营养物质。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl提供无机盐。; 2、琼脂 在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中煮沸溶化。琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。 3、pH 用稀酸或稀碱调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。;Page ;Page ;Page ;一、称量 准确、一种药品一把药勺，勿盖错药瓶盖 二、溶化 加水、微波炉加热;三、调pH 不可以调过头后来回调 四、分装试管 液体分装：试管高度的1/4左右； 固体分装：试管高度的1/5左右（制斜面） 三角瓶不超过瓶体的1/2 ； 分装时不要将培养基沾在管（瓶）口上，以免引起污染。 ;Page ;Page ;培养皿高度的1/3，静止放置，待完全凝固后使用。;Page ;八、无菌检查 将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24-48h，无菌生长即可使用。或储存于冰箱清洁的橱内，备用。 ;培养基配方 1、牛肉膏蛋白胨培养基配方 牛肉膏 0.5g 蛋白胨 1g NaCl 0.5g 琼脂 2g 水 100ml 调节 pH 至7.2;2、高氏Ⅰ号培养基配方;3、察氏培养基 用于真菌培养 配方：硝酸钠NaNO3 2g， 磷酸氢二钾K2HPO4 1.0g，