【网络在线课堂】数字PCR与CRISPR基因编辑强强联合！.pdf

【网络在线课堂】数字PCR 与 CRISPR 基因编辑强强 联合！ 11 月 19 日北京时间 23:00 （巴黎时间：17:00），欧洲分子生物学实 验室研究员 Moritz Kueblbeck 将于 Genomeweb 平台在线分享“ 在 CRISPR 编辑的细胞系中使用数字 PCR 进行标记拷贝数评估”相关知识。 本网络研讨会将介绍如何使用 dPCR 快速定量 CRISPR 编辑的 HeLa 细胞 中的绿色荧光蛋白拷贝数。讨论还将介绍 dPCR 的工作原理和采集后的数 据分析方法。 Moritz Kueblbeck 在德国海德堡的癌症研究中心(DKFZ)做了八年的研究 员。2014 年,他加入了 Jan Ellenberg 在海德堡的欧洲分子生物学实验室, 在不同实验室的项目中，他使用 CRISPR/Cas9 方法利用内源性的标记蛋白 (在 HeLa 和 U-2 OS 细胞进行不同标签的纯合敲入)进行人类细胞系基因组 编辑。 内容简介 ⚫ 荧光蛋白或自标记是使用荧光显微镜研究活细胞中蛋白质动力学的宝 贵工具。然而，定量成像需要目标蛋白(POI)的生理表达水平，特别是当 需要研究 POI 的化学计量相互作用时。 ⚫ CRISPR 使研究人员能够标记几乎任何感兴趣的目标基因，使其可以研 究相应 POI 的生理表达水平。然而，正确编辑细胞克隆的产生和选择— —即标记等位基因的预期数量和缺乏额外的整合——需要对标记的拷 贝数进行定量评估。 ⚫ 探讨 dPCR 是一种快速、可靠的荧光标记 CRISPR 编辑细胞定量检测方 法。