医疗药品无菌检查法验证课件.pptxVIP

无菌检查法验证;一、概述：;二、存在问题:;三、无菌检查的试验要求:;3.4.4 灵敏度检查：;3.5 稀释液、冲洗液：;四、无菌检查法验证:;4.3 验证方案制定原则：;4.4 验证重点环节分布：;4.5 验证方法：;无抑菌性样品的验证方法：依据产品溶解性和微生物限度选择合适的中性稀释剂溶解和稀释，用直接接种法验证，常用中性稀释液或淋洗液。 具有抑菌性样品的验证方法： ① 确定抑菌作用（抑细菌、真菌试验验证），选择敏感菌株对供试品抑菌活性去除效果检验（阳性菌回收试验）。 ② 消除样品抑菌性的方法验证：;化学钝化中和法（化学试剂中合法）：利用化学 （生物）专属性灭活，常用钝化剂有：对氨基苯甲酸、卵磷脂、聚山梨酯-80等。薄膜过滤法和 直接接种法也可用。对化学中和剂不敏感的样品，用酶中和，如β -内转氨酶。 稀释中和法：利用降低供试品的相对浓度，将样品稀释至最低抑菌浓度下进行。 薄膜过滤法：利用体积差异分离，通过薄膜过滤，微生物被截于滤膜，培养薄膜观察有无微生物生 长。各方法组合运用，效果更好。;③ 验证方法: a.验证分组： ?? A组:样品组,适当方法中和样品,加入少量验证微生物(接种量少于100cfu)。 ?? B组:对照组,0.1%蛋白胨或PH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液,加少量微生物(接种量少于100cfu). ?? C组：阳性对照组，不经中和处理，将实验菌株直接接种于培养基中(接种量少于100cfu)。;b.结果分析:A组与B组微生物生长数量相似，表明中和剂的中和方式有效消除了样品的抑菌性，如果B组与C组的微生物数量相似，表明样品预处理用中和剂的毒性、检测程序和培养条件等均不影响微生物生长。样品如无抑菌性，省去B组试验，A组与C组直接比较。A组微生物生长数量不及C组微生物生长数量，表明试验用器具材料或培养条件等方面存在对微生物生长不利因素。 c.为考查验证方法的稳定性和重现性，验证至少需3个不同批次的同类样品，分别进行3次验证实验。;五、供试品无菌检查验证:;5.3.4 验证结果评价：;供试品和阳性对照接种后、培养基容器按药典菌株要求温度下培养，时间不超过14days。 使用新的滤膜过滤器（不同厂家或批号、型号）??新 进行样品试验组、蛋白胨对照组和阳性对照组的验证确认。 验证结果评价： ① 供试品培养基容器内可见微生物生长明显（混浊），与阳性对照组比较结果相似，则在无菌检查试验中必须过滤与验证试验相等量的供试品、淋洗液。淋洗相同次数及使用相同量的培养基。 ② 供试品培养基容器内与阳性对照结果相比微生物生长不明显，应增加淋洗次数、重复上述试验。;六、验证合格标准:;6.2 直接接种法：;6.3 薄膜过滤法：;6.3.3 蛋白胨对照组：不加产品的稀释液，其他操作及实验条件与样品试验组相同。验证中和用钝化剂（针对需预处理的样品）、过滤器和滤膜材质是否会对微生物产生影响）。 6.3.4 阳性对照组：将与上述两组等量同种验证菌液（ 10-100cfu）直接种到固体培养基表面（或液体培养基中）。比较蛋白胨对照组和阳性对照组微生物的情况，估算滤器和滤膜造成微生物的损失量。 6.3.5 3次试验（3个不同批次的样品）结果评价：上述3组试验结果间差异均在70%以上（固体培养基）或培养14days内所有试验组的液体培养基微生物均有生长，则认为验证微生物的回收率基本相同，相应的微生物验证方法同过验证。;七、验证试验结果的评价与报告:;7.2 验证试验报告内容包括有：;无菌验证范例（注射剂无菌检查方法）;二、验证方法：;菌液计数：每种菌液接种工作皿、取平均值。计数结果列表（略） 。 方法验证及结果： ① 直接种法：取样品12支，分别接种8支硫乙醇酸盐和4支霉菌液体培养基2ml/支后，再按要求加入相应阳性菌液（30- 100cfu/ml)。置规定温度培养3-5days，逐日观察、记录微生物生长情况。列表（略）。 ② 薄膜过滤法：取样品1支，将样品过滤于封闭式滤器（3连筒/套）。用0.1%蛋白胨氯化钠溶液500ml冲洗后，再分别加入金黄色葡萄球菌，枯草杆菌50-100cfu/筒，同时做平均稀释液对照组。将稀释液对照滤筒和阳性菌的验证过滤筒置于规定温度下培养3-5days。逐日观察、记录微生物生长情况，列表（略）。 阳性对照：稀释剂+培养液，不加对照菌液，其它操作同前供试品试验，并计数试验菌液的计数。;三、结论： 选择无菌检查方法，确定阳性对照菌和0.1%蛋白胨水溶液的冲洗量。;?? 树立质量法制观念、提高全员质量意识。8月-238月-23Tuesday, August 29, 2023 ?? 人生得意须尽欢，莫使金樽空对月。23:46:3523:46:3523:468/29/2023 11:46:35 PM ?? 安全象只弓，不拉它就松，要想