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专题2 细胞工程
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术(1)
xxxxx中学 xx慧
在治疗烧伤病人时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。
但对一个大面积烧伤的病人来说, 自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源不足, 而且会产生排异反应。那么,怎样才能获得大量的自体健康皮肤呢?
思 许多动物的细胞能够分泌蛋白质,如抗体等。但是,单个细胞产生的蛋白质量
考 是很少的,怎样才能获得大量的分泌蛋白呢?
一、动物细胞培养
思 考
一、动物细胞培养
原理: 细胞增殖
1.概念和原理
分散成单个细胞
取动物 组织
剪碎
组织
细胞培养
一、动物细胞培养
①通常选胚胎或幼 龄动物,为什么?
③为什么 要分散成 单个细胞?
剪碎组织
培养贴附性细胞时,细胞要能贴附于底物上才能生长繁殖。
对培养瓶或培养皿壁的要求:表面光滑、无毒、易于贴附。
一、动物细胞培养
细胞悬液
2.过程
贴 壁
扩 展
吸 附
接 触
如何让细胞继续增殖?
一、动物细胞培养
接触抑制
2.过程
贴 壁
取动物组织块
用胰蛋白酶处理
制成细胞悬液
贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶 处理分散成单个细胞,制成细胞 悬液。
一、动物细胞培养
传代培养
原代培养
2.过程
细胞初次培养
细胞初次培养
剪碎组织
一、动物细胞培养
原代培养的细胞
2.过程
10代以内的细胞:
l 核型正常,遗传物质未改变。
一、动物细胞培养
第一代的细胞
2.过程
多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中。
思
考
l 体外培养的细胞需要什么样的环境条件?
l 体外培养细胞时需要提供哪些物质?
一、动物细胞培养
渗透压
3.条件
温度
pH
(1) 无菌、无毒的环境: 理
化
l 添加一定量的抗生素,定期更换培养液。 性
(2) 温度和pH: 质
?
l 温度36.5+0.5 ℃ ,pH为7.2~7.4
(3) 气体环境:细胞代谢 维持培养液的pH
l O2和CO2 (95% 空气和5% CO2 ) 地生长增殖
(4) 营养:
l 糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,通常需加入血清、血浆等。
一、动物细胞培养
保证细胞顺利
渗透压
3.条件
温度
pH
一、动物细胞培养
4.动物细胞培养技术的应用
基本营养物质:包括水、葡萄糖、氨基酸、
血清、血浆:促细胞生长因子
思
考
较植物组织培养培养基有何独特之处?
l 液体培养基
l 成分中有动物血清、血浆等
一、动物细胞培养
动物细胞培养液的主要成分
维生素及一些无机盐。
单个细胞
加培养液
细胞悬浮液
10代细胞
50代细胞
动物胚胎或幼龄动物的 组织、器官
离体的植物器官、组织 或细胞
一、动物细胞培养
5.植物组织培养和动物细胞培养的比较
愈伤组织
动物细胞培养
植物组织培养
胰蛋白酶
脱分化
再分化
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原 理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
常用固体培养基
常用液体培养基
培养基特有成分
蔗糖
植物激素
葡萄糖
动物血清、血浆
培养结果
植物体
细胞群体
培养目的
快速繁殖、培育脱毒苗
获得细胞或细胞产物
一、动物细胞培养
5.植物组织培养和动物细胞培养的比较
例题 用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是 ( C )
A.都需用CO2培养箱
B.都须用液体培养基
C.都要在无菌条件下进行
D.都可体现细胞的全能性
1.动物细胞工程技术的基础是 ( D )
2.下列属于动物细胞工程中的工具是 ( C )
A.动物细胞融合
B.单克隆抗体
C.胚胎移植
D.动物细胞培养
A.限制性内切酶
B.胃蛋白酶
C.胰蛋白酶
D.果胶酶
3.下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是( D )
A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 单层细胞
B.培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 无性生殖
C.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的 传至10~50代 D.恶性细胞系的细胞可进行传代培养
谢谢大家!
4.关于对某种动物的肝肿瘤细胞进行培养的叙述中,错误的是( D )
A.制备肝肿瘤细胞悬液时,可用胰蛋白酶处理肿瘤组织块
B.培养基中通常需加入适量的抗生素、血清或血浆等成分
C.体外培养时肿瘤细胞可能失去接触抑制现象而互相堆积
D.细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用
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