【中小学】高二上下册分解纤维素的微生物的分离课件公开课教案教学设计课件.pptx

专题2 微生物的培养与应用 课题3 分解纤维素的微生物的分离 xxxxx中学 xx慧 亿吨，其中40%~60%能被土壤中某些微生物 分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。 对这些微生物的研究与应用，使人们能够 利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处 理服装面料等。而要研究这些微生物，首先 需要将它们从土壤中种类众多的微生物中分 离出来。在本课题中，我们将探讨如何分离 土壤中能够分解纤维素的微生物。 课题背景 纤维素是地球上含量最丰富的的多糖类物 质。地球上的植物每年产生的纤维素超过70 纤维素的结构式 一、基础知识 1. 纤维素与纤维素酶 (1) 纤维素 纤维素的结构式 一、基础知识 1. 纤维素与纤维素酶 (2) 纤维素酶 纤维素 纤维二糖 葡萄糖 ④ 在乙试管中加入1 mL纤维素酶。 ⑤ 两支试管固定在50mL锥形瓶中，放在转速 为140r/min的摇床上振荡1h (人工振荡) 。 ⑥ 结果：乙试管的滤纸条消失。 ⑦ 结论：纤维素酶可以分解纤维素。 一、基础知识 1. 纤维素与纤维素酶 ① 取2支20 mL的试管。 ② 各加入一张滤纸条 (富含纤维素) 。 ③ 各加入pH 4.8、物质的量浓度为0.1 mol/L 的醋酸－醋酸钠缓冲液11 mL和10 mL。 纤维素酶分解纤维素的实验 11 mL 甲 乙 一、基础知识 2. 纤维素分解菌的筛选 (1) 筛选的方法 刚果红染色法：该方法可以通过颜色反应直接对微生物进行筛选。 (2) 筛选的原理 刚果红(简称CR)：是一种染料，CR能与纤维素这样的多糖物质 形成红色复合物，而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 (2) 筛选的原理 在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的 纤维素形成红色复合物。 一、基础知识 2. 纤维素分解菌的筛选 (1) 筛选的方法 结论:可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 现象：当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的红色复合物就无 法形成(消失)，培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。 思考：本实验流程与课题2中的 实验流程有何异同？ 二、实验设计 思考：为什么要在富含纤维素的环境中 寻找纤维素分解菌？ 1.纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的土壤环境中。 二、实验设计 1.大多分布在富含纤维素的土壤环境中。 2.如果找不到适合的环境，可以将滤纸埋在土壤中30d。 思考：将滤纸埋在土壤中有什么作用？ 你认为滤纸应该埋进土壤多深？ 二、实验设计 纤维素分解菌的选择培养基 配方 纤维素粉 NaNO3 Na2HPO4 ·7H2O KH2PO4 MgSO4 ·7H2O KCl 酵母膏 水解酪素 将上述物质溶解后,用蒸馏水 定容到1000 mL 1.目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确 保能够从样品中分离所需要的微生物。 2.制备纤维素分解菌的选择培养基。 思考：此培养基是液体培养基还是 固体培养基？为什么？ 液体培养基，因为配方中无凝固剂 (琼脂 二、实验设计 5g 1g 1.2g 0.9g 0.5g 0.5g 0.5g 0.5g ) 。 纤维素分解菌的选择培养基 配方 纤维素粉 NaNO3 Na2HPO4 ·7H2O KH2PO4 MgSO4 ·7H2O KCl 酵母膏 水解酪素 将上述物质溶解后,用蒸馏水 定容到1000 mL 1.目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确 保能够从样品中分离所需要的微生物。 2.制备纤维素分解菌的选择培养基。 二、实验设计 5g 1g 1.2g 0.9g 0.5g 0.5g 0.5g 0.5g 纤维素分解菌的选择培养基 配方 5g 1g 1.2g 0.9g 0.5g 0.5g 0.5g 0.5g 将上述物质溶解后,用蒸馏水 定容到1000 mL 思考：如何进一步纯化纤维素分解菌呢？ 思考：你能否设计一个对照实验，说明 选择培养的作用？ 1.目的：增加纤维素分解菌的浓度，以 确保能够从样品中分离所需要的微生物。 2.制备纤维素分解菌的选择培养基。 用牛肉膏蛋白胨培养基培养微生物，若选择培养 基上微生物数量明显少于牛肉膏蛋白胨培养基上 微生物的数量,则说明培养基起到了选择作用。 纤维素粉 NaNO3 Na2HPO4 ·7H2O KH2PO4 MgSO4 ·7H2O KCl 酵母膏 水解酪素 二、实验设计 鉴别纤维素分解菌的培养基 配方 CMC-Na 酵母膏 KH2PO4 琼脂 土豆汁 将上述物质溶解后,用蒸馏水 定容到1000 mL 二、实验设计 将选择培养后的菌液进行梯度稀释: 5-10g 1g 0.25g 15g 100 mL 1.制备鉴别培养基： 方法一：先培养微生物，再加入刚 果红进行颜色反应。 方法二：在倒平