药物分析第四章药物的含量测定方法演示.pptVIP

（1）对照品比较法 分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被测药物的量应为供试品溶液中被测成分规定量的100±10%，所用溶剂量两者相同，在规定的波长下测定吸光度。按下式计算结果： Cx供试品溶液浓度； CR对照品溶液浓度； Ax，AR对应吸光度； 当前第30页\共有86页\编于星期日\14点 （1）对照品比较法 对原料药: 对应于稀释体积浓度 当前第31页\共有86页\编于星期日\14点 （1）对照品比较法 对于固体制剂: P16：制剂的标示量：系指每一支、片或每一个单位制剂中含有主药的重量（或效价）或含量或装量。 当前第32页\共有86页\编于星期日\14点 （一）紫外-可见分光光度法 当前第33页\共有86页\编于星期日\14点 （2）吸收系数法 引入吸光系数的含量计算方法 溶液 片剂 mg转化单位 g/mL 当前第34页\共有86页\编于星期日\14点 （2）吸收系数法 示例：盐酸氯丙嗪注射液的含量测定： 精密量取本品适量（约相当于盐酸氯丙嗪50mg），置200mL量瓶中，加盐酸溶液（9-1000）稀释至刻度，摇匀；精密量取2mL，置100mL量瓶中，用盐酸（9—1000）稀释至刻度，摇匀；在254nm下测定吸光度，按盐酸氯丙嗪的吸收百分系数计算，即得。 注射液，选溶液公式，如下： 当前第35页\共有86页\编于星期日\14点 （2）吸收系数法 D为供试品溶液的稀释体积：共稀释了200mL×100÷2=10000mL ，是注射液规格（mL/支）：已知 B，注射液标示量（mg/支）：已知 V，供试品取样量：2mL A，吸光度：测量值，已知 ：已知 当前第36页\共有86页\编于星期日\14点 固体试剂公式推导如下： （2）吸收系数法 当前第37页\共有86页\编于星期日\14点 3.计算分光光度法 多种，具体按每种药物规定的方法进行 如：VA的三点校正法 不宜做含量测定 4.比色法 加入显色剂后，按照对照品比较法测定影响显色因素很多，故需注意平行操作空白溶剂：溶剂+显色剂，同法处理 （一）紫外-可见分光光度法 当前第38页\共有86页\编于星期日\14点 （二）荧光分析法 特点 灵敏度高，可达10-10~10-12g/mL 要求低浓度下测定，防止自熄灭作用 干扰因素多，须做空白测定 荧光弱的药物可衍生化后测定，可提高灵敏度和选择性 当前第39页\共有86页\编于星期日\14点 含量测定 原理：当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时，物质在一定浓度范围内，其荧光强度R与该物质浓度C成正比 方法：对照品比较法 计算： （二）荧光分析法 当前第40页\共有86页\编于星期日\14点 根据混合物中各组分的色谱行为差异，先行分离后再在线或离线对各组分逐一进行分析的方法，是分离分析混合物的最有力手段。 按分离原理：吸附；分配；离子交换；排阻色谱 分类 按分离方法：PC；TLC；柱色谱；GC；HPLC 特点：高灵敏度、 高效能、高速度、应用广泛 三、色谱分析法 当前第41页\共有86页\编于星期日\14点 h W1/2 ? ? 0.5h 0.607h W 0 t t0 tR 当前第42页\共有86页\编于星期日\14点 色谱柱 填充剂常用：十八烷基硅烷键合硅胶 当前第43页\共有86页\编于星期日\14点 1. 对仪器一般要求 固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变 其他均可适当改变 色谱图20分钟内记录完毕 2. 系统适用性试验 色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2 分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2); 应大于1.5 重复性：对照液连续进样5次，峰面积RSD≤2.0％ 拖尾因子：T = W0.05h/2d1 应在0.95 ～ 1.05 （一）HPLC 当前第44页\共有86页\编于星期日\14点 （1）内标法加校正因子测定供试品中主成分含量 对照液（R）： AR CR 峰面积 含量 内标液（S）： AS CS 供试液（X）： AX CX f= ———— AS/CS AR /CR f= ———— A’S / C’S Ax /Cx Cx=f· ———— Ax A’S / C’S 3. HPLC测定法 当前第45页\共有86页\编于星期日\14点 （