海参多肽的分离纯化及功能特性研究.docx

海参多肽的分离纯化及功能特性研究 海洋科是属于嗜水性动物和嗜水性动物的。根据人参科的外部特征，它被分为四个目和九个科（分支手：瓜参、沙鸡科、高球参科；献花主题：新纳科、海参和刺科；甘薯参科：甘薯参科；无足目量：锚定参科和指状参科）。全世界约有1100种海参,其中40种可食用,我国有100多种,其中20多种可食用。干制的海参蛋白质的成分很高,接近90%,多糖6%左右,脂质约占4%,含有少量核酸以及钙、镁、铁、锰、锌、铜、钼、硒等微量元素。不同种类的海参由于生长环境的不同,其营养价值和生物活性也有所差异,其中以刺参营养价值最高,属于海参中的精品,被称为“参中之冠”。自古以来,海参作为营养食品和保健食品被广泛使用,海参常被制成海参干粉、海参熟制品、海参罐头等,大量的应用是把海参作为食品原料进行简单的初级加工。海参多肽是以新鲜海参为原料,经过蛋白酶酶解,分离纯化得到的具有功能特性的生物活性物质,研究发现海参多肽具有抗氧化、降血压、抗肿瘤、抗疲劳等多种功能。本文主要对海参多肽的生物活性以及制备分离纯化方法进行介绍,为海参多肽在食品、医药、保健品等行业的应用提供依据和思路。 1 人参的生物活性 1.1 实践抗氧化能力 生物体内氧自由基(oxygen-derived free adicals.OFR),主要包括超氧阴离子(O-2·)、羟自由基(·OH)、羟过氧自由基(HOO·)、有机过氧自由基(ROOy)等,在生物体内不断产生,也不断地被分解,处于动态平衡之中,维持在一个正常的生理水平上。若体内自由基过量,可损伤体内的蛋白质、核酸和生物膜,引起各种疾病。而自由基清除剂可清除体内自由基,保护机体免受氧化损害。因此,近年来,对体内自由基清除剂的研究备受关注,如超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)、抗氧化剂谷胱甘肽(glutathione,GSH)和维生素等。 海参是一种高蛋白低脂肪的食品,不仅体腔液内GSH以及总抗氧化能力的含量高,而且动物实验证明海参多肽可以提高机体内的抗氧化酶的酶活。侯付景等通过小鼠喂养实验表明东海乌参(Acaudina leucoprocta)水解液使小鼠血清和肝脏组织中的SOD、GSH-PX活力明显提高,MDA(丙二醛)含量显著降低,有效清除体内堆积的自由基。有关研究表明,海参多肽抗氧化性的强弱主要与多肽的氨基酸组成、氨基酸序列以及空间构象有关。而目前研究主要集中在不同海参多肽的抗氧化能力与多肽分子量和浓度之间的关系,赵玲等测定比较了大西洋海参(Holothuria coluber Semper)、东海海参(Acaudina mobpadioides Semper)、刺参(Apostichopus japonicus)和加州拟刺参(Parastichopus californicus)这4种海参多肽的抗氧化活性,其结果显示大西洋海参多肽、刺参多肽和加州拟刺参多肽分别对·OH、DPPH·(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基)和O-2·的清除能力最强。不仅新鲜海参多肽具有良好的抗氧化能力,有研究表明带有内脏的干制海参制备的多肽具有更高的抗氧化能力,并且不同浓度海参多肽抗氧化能力也不同。苏永昌等的研究表明随着海地瓜(Acaudina molpadioides)多肽浓度的增加,多肽对羟自由基的清除能力迅速上升,当多肽浓度大于20mg/mL,多肽清除羟自由基能力则表现为平缓的上升趋势,其清除羟自由基和超氧自由基的IC50(half maximal inhibitory concentration of a substance,半抑制浓度)分别为12.5、23.6mg/mL。此外,王静等还发现不同分子量海参(Apostichopus japonicus)多肽清除·OH、O-2·、H2O2的IC50也不同,其结果表明:4种分子量范围的海参多肽清除3种氧自由基的能力存在差异,大小顺序为CPHIV(3ku)CPHIII(3~5ku)CPHII(5~10kuCPHI(10ku),分子量越小的海参多肽清除3种氧自由基的能力越大,4种分子量范围的海参多肽清除O-2·的效果最好,其次是H2O2,最后是·OH。 1.2 费用抑制剂的活性 随着人们生活水平的不断提高,高蛋白、高脂肪的摄食越来越大众化,高血压的患病率也逐步上升。血管紧张素转换酶(Angiotension-Ⅰ-converting Enzyme,ACE)是肾素-血管紧张素系统(Renin-Angiotensnisystme,ARS)和激肽释放酶-激肽系统(Kal1ikrein-KininSystme,KKS)的关键酶,在ARS中,AC